| 快速检测小反刍兽疫病毒RT—LAMP方法的建立 |
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| 引用本文： | 李伟,李刚,范晓娟,张坤,贾风琴,史利军,Hermann Unger.快速检测小反刍兽疫病毒RT—LAMP方法的建立[J].中国预防兽医学报,2009,31(5). |
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| 作者姓名： | 李伟 李刚 范晓娟 张坤 贾风琴 史利军 Hermann Unger |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院,北京畜牧兽医研究所,北京,100193
2. 中国农业科学院,北京畜牧兽医研究所,北京,100193;动物营养学国家重点实验室,北京,100094
3. FAO/IAEA农业生物技术实验室,Seibersdorf奥地利 |
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| 基金项目： | 国家科技支撑计划，国家高技术研究发展计划(863计划)，FAO/IAEA项目，引进国际先进农业科学技术计划(948计划) |
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| 摘 要： | 本研究采用一步法反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP)建立了一种快速、灵敏、高度特异的检测小反刍兽疫病毒(PPRV)的方法.针对PPRV-N基因保守区域设计4条引物,在Bst大片段聚合酶的作用下,可以实现DNA的梯状等温扩增.优化RT-LAMP的反应体系,并检验其灵敏性、特异性.一步法RT-LAMP检测方法从核酸抽提到检测结果出现仅需70 min,该方法具有良好的特异性,与同属的犬瘟热病毒无交叉反应,灵敏度是RT-PCR的1 000倍,是巢式RT-PCR的100倍.结果证明,RT-LAMP方法可快速、灵敏、特异、经济地检测PPRV,在基层和实验室都具有良好的应用前景.
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| 关 键 词： | 小反刍兽疫病毒 核酸检测 |
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