番鸭呼肠孤病毒MW97106C蛋白基因克隆及其在E.coli中表达 |
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作者姓名: | 张云 欧阳岁东 刘明 胡奇林 韩周 林锋强 |
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作者单位: | [1]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨150001 [2]福建省农业科学院畜牧兽医研究所,福州350003 [3]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨150001//福建省农业科学院畜牧兽医研究所,福州350003 |
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摘 要: | 应用RT~PCR扩增出番鸭呼肠孤病毒MW9710株的σC基因,序列分析表明σC基因核苷酸数为810bp.编码269个氨基酸,相对分子量为29.4ku,DNAstar软件分析MW9710株的σC核苷酸序列和法国番鸭呼肠孤病毒89026株有93%的同源性,而与禽呼肠孤病毒的同源性仅在21%~25%之间,表明番鸭呼肠孤病毒是一类不同于禽呼肠孤病毒的新病毒。将σC基因片段亚克隆到原核表达载体pET32a中.经IPTG诱导后在大肠杆菌BL21(DE3)中得到高效表达,Western—blot进一步验证了表达产物与番鸭呼肠孤病毒阳性血清反应.表明σC基因表达产物具有免疫原性,为下一步研制番鸭呼肠孤病毒诊断试剂盒和基因工程疫苗奠定基础。
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关 键 词: | E.coli 基因克隆 禽呼肠孤病毒 Western 蛋白 原核表达载体 基因表达产物 基因工程疫苗 PCR扩增 相对分子量 核苷酸序列 诊断试剂盒 法国番鸭 软件分析 高效表达 大肠杆菌 IPTG 基因片段 免疫原性 阳性血清 blot 同源性 |
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