| 猪传染性胃肠炎病毒特异性受体APN 功能区的初步鉴定 |
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| 引用本文： | 刘博奇,李广兴,王衡,尹杰超,李一经,王君伟,张赟硕,任晓峰.猪传染性胃肠炎病毒特异性受体APN 功能区的初步鉴定[J].黑龙江畜牧兽医,2009(6). |
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| 作者姓名： | 刘博奇 李广兴 王衡 尹杰超 李一经 王君伟 张赟硕 任晓峰 |
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| 作者单位： | 东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030 |
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| 基金项目： | 教育部高等学校科技创新工程重大项目培育资金项目，黑龙江省教育厅海外学人科研项目 |
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| 摘 要： | 试验为了构建猪氨肽酶N（pAPN）不同基因片段大小的重组质粒并进行原核表达及纯化，经Western—blot、ELISA方法初步鉴定猪氨肽酶N受体功能区。试验构建重组了质粒pET30a—pAPN1（106～669nt）、pET30a—pAPN2（670-1044 nt）、pET30a—pAPN3（1045-1773nt）、pET30a—pAPN4（1774～2328 nt）、pET30a—pAPN5（2329—2889 nt）、pET30a—pAPN6（106—1044nt）、pET30a—pAPN7（1774—2889 nt）；转化宿主菌BL21（DE3）细胞，IPTG诱导表达蛋白，包涵体经SDS聚丙烯酰氨凝胶电泳回收纯化；用Western—blot、ELISA方法经抗pAPN多克隆抗体初步筛选出pAPN受体功能区。结果表明：pET30a—pAPN2、pET30a—pAPN3、pET30a—pAPN6、pET30a—pAPN7蛋白均以包涵体形式表达并纯化。pET30a—pAPN3、pET30a-6、pET30a-7能与抗pAPN多抗产生特异性反应。经抗pAPN多抗筛选初步鉴定出其主要抗原功能区在36—153aa、349—591aa、592～963aa内。
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| 关 键 词： | 猪氨肽酶N 蛋白表达 受体 |
Initial identification of the domain of TGEV specific receptor APN |
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