| 甘蔗镰孢菌插入突变体库的构建、致病变异突变体筛选及突变基因定位 |
| |
| 引用本文： | 蒙姣荣,黄海娟,杨惠贞,曾泉,李珅雨,陈保善.甘蔗镰孢菌插入突变体库的构建、致病变异突变体筛选及突变基因定位[J].热带作物学报,2023(2):233-245. |
| |
| 作者姓名： | 蒙姣荣 黄海娟 杨惠贞 曾泉 李珅雨 陈保善 |
| |
| 作者单位： | 1. 广西大学农学院/广西甘蔗生物学重点实验室;2. 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室;3. 广西大学生命科学与技术学院 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（No.31960031）； |
| |
| 摘 要： | 由镰孢菌复合种引起的甘蔗梢腐病（pokkah boeng disease, PBD）是甘蔗的主要病害之一。在广西，甘蔗镰孢菌（Fusarium sacchari）是PBD的优势病原菌。尽管PBD的研究已有较长的历史，但甘蔗镰孢菌的致病分子机理远未得到阐明。为研究甘蔗镰孢菌的致病分子机理，本研究采用农杆菌介导的遗传转化（Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation,ATMT）技术构建甘蔗镰孢菌FF001菌株的T-DNA插入突变体库。采用携带潮霉素B磷酸转移酶基因pTHR1-AH双元载体的农杆菌菌株AGL-1介导转化F. sacchari分生孢子，获得3018个转化子；随机选取12个转化子进行PCR检测和Southern杂交分析，结果显示所有检测突变株均插入潮霉素B磷酸转移酶基因，多数为单拷贝插入。采用离体叶片接种评价转化子的致病力，获得致病力明显减弱21个和致病力增强9个，共30个突变体。通过TAIL-PCR扩增测序并与甘蔗镰孢菌基因组序列比对，确定了其中27个突变株的T-DNA插入位点。观察到多个插入位点伴随有基因组片段缺失，导致1...
|
| 关 键 词： | 甘蔗镰孢菌 农杆菌介导 遗传转化 致病力相关基因 侧翼序列 甘蔗梢腐病 |
|
|
