| 猪瘟石门系强毒株SYBR Green-I染料法实时荧光定量PCR方法的建立 |
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| 引用本文： | 王伟,邹月红,李雪松,陈欣,郎越坤,田华斌,符芳,李曦,李集临.猪瘟石门系强毒株SYBR Green-I染料法实时荧光定量PCR方法的建立[J].中国畜牧兽医,2011,38(3). |
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| 作者姓名： | 王伟 邹月红 李雪松 陈欣 郎越坤 田华斌 符芳 李曦 李集临 |
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| 作者单位： | 1. 哈尔滨师范大学生命科学与技术学院,黑龙江,哈尔滨,150001
2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001 |
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| 基金项目： | 黑龙江省科技攻关重点项目 |
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| 摘 要： | 为了能快速、准确地诊断猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)石门系强毒,根据登录在GenBank上23株Shimen毒株的全基因组序列,利用DNASIS软件进行序列分析,设计1对特异的荧光定量引物.建立猪瘟石门系强毒株SYBR Green-Ⅰ染料法实时荧光定量PCR快速检测方法.试验结果表明,本方法最低可检测到的Shimen病毒cDNA含量为100拷贝/μL,敏感度至少是普通PCR的100倍;猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、牛流行腹泻病毒Ⅰ工型( BVDV-1)和猪瘟病毒C株均无特异性扩增,证明本方法具有很强的特异性;通过批内和批间重复试验,其变异系数<0.7%,结果显示本方法具有很好的重复性.本研究建立了猪瘟石门系强毒株SYBR Green-Ⅰ染料法实时荧光定量PCR快速检测方法,为猪瘟的预防与控制提供了有效的技术手段,并为猪瘟强毒试剂盒的研发奠定了基础.
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| 关 键 词： | 猪瘟病毒 Shimen毒株 Green-Ⅰ染料法实时荧光定量PCR |
Development of a Real-time Flourescent Quantitative PCR for Detection of Classical Swine Fever Virus Shimen Strain |
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| WANG Wei,ZOU Yue-hong,LI Xue-song,CHEN Xin,LANG Yue-kun,TIAN Hua-bin,FU Fang,LI Xi,LI Ji-lin.Development of a Real-time Flourescent Quantitative PCR for Detection of Classical Swine Fever Virus Shimen Strain[J].China Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2011,38(3). |
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| Authors: | WANG Wei ZOU Yue-hong LI Xue-song CHEN Xin LANG Yue-kun TIAN Hua-bin FU Fang LI Xi LI Ji-lin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | SYBR |
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