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风信子ISSR-PCR体系的优化及引物筛选
引用本文:胡凤荣,王斐,王志强,任翠,鲍仁蕾.风信子ISSR-PCR体系的优化及引物筛选[J].分子植物育种,2013(1):139-144.
作者姓名:胡凤荣  王斐  王志强  任翠  鲍仁蕾
作者单位:北京林业大学;南京林业大学
基金项目:中国博士后科学基金面上项目(20100470217);江苏省高校优势学科建设工程项目共同资助
摘    要:以风信子基因组DNA为ISSR-PCR扩增模板,采用单因素试验方法,对影响PCR扩增体系中Mg2+浓度、dNTPs、模板DNA及引物浓度、Taq酶的用量5个因素进行研究,建立了风信子ISSR-PCR扩增最佳反应体系,即:20μL反应体系中分别加入2μL10×Buffer、1.4μL Mg2+(25mmol/L)、1.5μL dNTPs(2.5mmol/L)、1.5μL引物(10pmol/μL),0.2μLTaq酶(5U/μL),1.2μL模板(30ng/μL),ddH2O补足体积。并以此体系对110条引物进行筛选,最终获得了多态性高,重复性好的引物12条。

关 键 词:风信子  ISSR-PCR  引物筛选

Optimization of ISSR-PCR Reaction System and Primer Selection for Hyacinth
Hu Fengrong, Wang Fei,Wang Zhiqiang,Ren Cui,Bao Renlei.Optimization of ISSR-PCR Reaction System and Primer Selection for Hyacinth[J].Molecular Plant Breeding,2013(1):139-144.
Authors:Hu Fengrong  Wang Fei  Wang Zhiqiang  Ren Cui  Bao Renlei
Institution:1 Beijing Forestry University, Beijing, 100083; 2 Nanjing Forestry University, Nanjing, 210037
Abstract:
Keywords:
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