| 兔多杀性巴氏杆菌热休克蛋白60基因的原核表达及抗原性分析 |
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| 引用本文： | 卢艳,郭东春,刘家森,原冬伟,姜骞,司昌德,林欢,崔玉东,曲连东.兔多杀性巴氏杆菌热休克蛋白60基因的原核表达及抗原性分析[J].黑龙江畜牧兽医,2012(7):108-110. |
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| 作者姓名： | 卢艳 郭东春 刘家森 原冬伟 姜骞 司昌德 林欢 崔玉东 曲连东 |
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| 作者单位： | 黑龙江八一农垦大学动物科技学院;中国农业科学院 哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室实验动物研究室 |
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| 基金项目： | 黑龙江省科技攻关项目(PC09S02) |
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| 摘 要： | 为了研究多杀性巴氏杆菌(P.multocida,Pm)热休克蛋白60(Hsp60)基因表达产物的抗原性,试验根据已发表的Pm 70株序列(AE004439)设计了1对引物,采用PCR技术扩增了兔多杀性巴氏杆菌C51-17株Hsp60的基因序列,将扩增产物与表达载体pPRO-EX-htb连接,得到重组表达质粒pHT-Hsp60,再用BamHⅠ和XhoⅠ双酶切鉴定并测序确认正确后,将重组表达质粒pHT-Hsp60转化大肠杆菌BL21(DE3)并诱导表达,进行SDS-PAGE分析和Western-blot检测。结果表明:SDS-PAGE表达蛋白约为60 ku,与预期的Hsp60分子质量一致;表达产物与兔多杀性巴氏杆菌阳性血清发生特异性反应,说明表达产物具有良好的抗原性。
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| 关 键 词： | 多杀性巴氏杆菌 Hsp60 原核表达 |
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