| 海蓬子盐胁迫初期抑制消减杂交cDNA文库的构建 |
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| 引用本文： | 张大栋,马鸿翔,吉晓佳,周春霖,王茂文,汤日圣,杨永华. 海蓬子盐胁迫初期抑制消减杂交cDNA文库的构建[J]. 江苏农业学报, 2006, 22(2): 113-116 |
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| 作者姓名： | 张大栋 马鸿翔 吉晓佳 周春霖 王茂文 汤日圣 杨永华 |
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| 作者单位： | 江苏省农业科学院农业遗传生理研究所暨江苏省农业生物学重点实验室,江苏,南京,210014;南京大学医药生物技术国家重点实验室,江苏,南京,210093;江苏省农业科学院农业遗传生理研究所暨江苏省农业生物学重点实验室,江苏,南京,210014;南京大学医药生物技术国家重点实验室,江苏,南京,210093;江苏沿海地区农业科学研究所,江苏,盐城,224002 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;江苏省农业科学院资助项目 |
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| 摘 要： | 为提高缩叶肉质盐生植物海蓬子总RNA和mRNA的质量,将改良CTAB法与Tripure试剂盒方法相结合,从300 mg海蓬子发芽后20 d的幼苗中成功分离和纯化了高纯度的总RNA和mRNA。并以无NaC l处理为D river,以200 mmol/L NaC l处理24 h、48 h、72 h的幼苗为Tester,通过cDNA双链的合成及两次PCR扩增,富集到两组处理中差异表达的大小在200~1 300 bp的cDNA序列,pGEM-T的连接和蓝白斑筛选表明杂交文库滴度和重组率分别达到2.6×107和96%,共收集阳性克隆12 000个,形成了抑制消减杂交的质粒cDNA文库。随机挑取酶切质粒的电泳分析表明,载体中均有插入片段。两种RNA提取方法的结合有效提高了多汁多色素海蓬子RNA的质量,高效抑制消减杂交文库的建立为进一步分析基因的差异表达及分离抗盐基因奠定了基础。
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| 关 键 词： | 盐生植物海蓬子 抑制消减抑制杂交 cDNA文库 RNA分离 |
| 文章编号： | 1000-4440（2006）02-0113-04 |
| 收稿时间： | 2005-07-25 |
| 修稿时间： | 2005-07-25 |
Construction of cDNA Library of Salicornia bigelovii Torr. During Early Stage of Salt Stress Based on Suppression Subtractive Hybridization |
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| ZHANGDa-dong,MA Hong-xiang,JI Xiao-jia,ZHOU Chun-lin,WANG Mao-wen,TANG Ri-sheng,YANG Yong-hua. Construction of cDNA Library of Salicornia bigelovii Torr. During Early Stage of Salt Stress Based on Suppression Subtractive Hybridization[J]. Jiangsu Journal of Agricultural Sciences, 2006, 22(2): 113-116 |
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| Authors: | ZHANGDa-dong MA Hong-xiang JI Xiao-jia ZHOU Chun-lin WANG Mao-wen TANG Ri-sheng YANG Yong-hua |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | halophyte suppression subtractive hybridization cDNA library RNA isolation |
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