鸡γ-干扰素基因(ChIFN-γ)的瞬时表达及其抗病毒活性检测 |
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引用本文: | 殷喆,张文龙,陈伟业,刘胜旺,步志高,王君伟,吴东来.鸡γ-干扰素基因(ChIFN-γ)的瞬时表达及其抗病毒活性检测[J].农业生物技术学报,2009,17(6). |
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作者姓名: | 殷喆 张文龙 陈伟业 刘胜旺 步志高 王君伟 吴东来 |
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作者单位: | 1. 东北农业大学动物医学学院,哈尔滨,150030;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,国家兽医生物技术重点实验室,农业部兽医公共和卫生重点开放实验室,哈尔滨,150001 2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,国家兽医生物技术重点实验室,农业部兽医公共和卫生重点开放实验室,哈尔滨,150001 3. 东北农业大学动物医学学院,哈尔滨,150030 |
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基金项目: | 国家高科技研究发展计划(863)项目,黑龙江省自然科学基金重点项目 |
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摘 要: | 采用PCR技术从质粒pET-ChIFN-γ中扩增得到鸡(Gallus gallus)γ-干扰素(chicken interferon gamma,ChIFN-γ)基因,将其亚克隆到真核表达载体pCAGGS中.将鉴定正确的克隆命名为pCAGGS-ChIFN-γ,体外转染鸡胚成纤维(CEF)细胞,24 h后经间接免疫荧光(IFA)和免疫印迹(Western blot)检测,表达蛋白具有良好的免疫原性.然后利用表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组水疱口炎病毒(VSV*GFP)在CEF细胞上检测表达的ChIFN-γ抗病毒活性(AVA),经检测其抗病毒活性为2×10~3AU/mL,并且其活性可被抗鸡IFN-γ的多克隆抗体阻断.
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关 键 词: | 鸡γ-干扰素基因 瞬时表达 抗病毒活性检测 ChIFN-γ gene |
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