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| 鸡胚成骨细胞分离培养方法的建立 | |
| 作者单位： | ;1.扬州大学兽医学院;2.江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;3.江苏省人兽共患病学重点实验室 |
| 摘 要： | 为了寻找一种可以获得大量高纯度、活力强的鸡胚成骨细胞(osteoblast,OB)的分离培养方法,利用胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶2次消化法分离18日龄鸡胚颅盖骨细胞。CCK-8法、台盼蓝染色对其进行增殖和活性鉴定;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和茜素红染色(alizarin red staining)对其进行特异性染色鉴定;实时荧光定量PCR扩增检测鸡胚OB标志性基因Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、ALP、成骨细胞特异性转录因子(osteoblast specific transcription factor,OSX)mRNA的表达。结果显示,分离的细胞活性较强,具有良好的增殖能力,ALP和茜素红染色均呈强阳性,能高表达ALP、Runx2、OSX基因;表明所分离的颅盖骨细胞具有OB特性,活性强,纯度高,为进一步探讨家禽骨骼疾病的发生及防控机制奠定基础。 |
| 关 键 词： | 鸡胚 成骨细胞 茜素红 Runt相关转录因子2(Runx2) 成骨细胞特异性转录因子(OSX) |
Establishment in isolation and culture of osteoblasts from chicken embryo |
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| Abstract: | |
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