mRNA差异显示法筛选‘砀山酥梨’褐皮芽变相关差异表达基因

【目的】研究‘砀山酥梨’褐皮芽变形成机理。【方法】以‘砀山酥梨’及其褐皮芽变‘锈酥’花后110 d幼果果皮为试材，利用mRNA差异显示技术筛选相关差异表达基因，基于Gene Ontology方法、采用Blast2 Go软件进行基因功能分析，结合real-time RT-PCR技术验证差异表达基因在花后不同时期的表达水平差异。【结果】筛选出的63条目的片段中，60条质量较高、3条质量较低；差异表达基因包含α-微管蛋白、甲基转移酶、甘露糖- 6-磷酸异构酶、液泡膜焦磷酸酶和泛素等数十个基因。花后90—150 d，α-微管蛋白基因在‘锈酥’中表达量均高于‘砀山酥梨’，特别是在花后90和110 d，其表达量分别为‘砀山酥梨’的5倍和3倍。而在花后90和110 d时，Ca2+/CaM基因在‘锈酥’果皮中的表达略高于‘砀山酥梨’；在120—150 d时，Ca2+/CaM依赖的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因在‘锈酥’果皮中的表达明显低于‘砀山酥梨’。除花后130 d，甘露糖- 6-磷酸异构酶基因在‘砀山酥梨’和‘锈酥’果皮中表达差异不明显。【结论】由试验结果推测，α-微管蛋白基因在果实发育全程的增量表达，以及蛋白激酶基因在果实发育后期表达水平下调，使‘锈酥’果皮细胞壁加厚、木栓化程度加大，导致了‘锈酥’褐色果皮的形成。

Differential Expression Genes of ‘Dangshansuli’ Pear Russet Mutant Screened with DDRT-PCR