人gp130-IL-12Rβ2胞外段融合蛋白基因克隆及真核表达载体的构建 |
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引用本文: | 黄娟,李博文,梁艳芳,陈莎莎,杨维青,周克元,曾今诚.人gp130-IL-12Rβ2胞外段融合蛋白基因克隆及真核表达载体的构建[J].湛江医学院学报,2016(3):245-249. |
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作者姓名: | 黄娟 李博文 梁艳芳 陈莎莎 杨维青 周克元 曾今诚 |
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作者单位: | 1. 广东医科大学医学检验学院实验教学示范中心,广东东莞,523808;2. 广东医科大学广东省医学分子诊断重点实验室,广东东莞,523808;3. 广东省东莞市第五人民医院病理科,广东东莞,523905;4. 广东医科大学医学检验学院临床微生 |
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基金项目: | 国家自然科学青年基金项目(81500007),广东省科技计划项目(2014A020212298),广东省医学科研基金项目(A2015206),广东省大学生创新创业训练计划项目(201510571049、201510571051),广东医学院大学生创新创业训练计划项目(XJ105711454、XJ105711458),广东医学院大学生创新实验项目(2014ZYDC006、2014ZYDC007、2015ZYDC002) |
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摘 要: | 目的 克隆含人gp130和IL-12Rβ2胞外段的基因并构建人gp 130-IL-12Rβ2胞外段融合蛋白基因真核表达载体.方法 设计合成特异性引物,以人外周血单个核细胞(PBMC)cDNA为模板,PCR法扩增gp130胞外段基因和IL-12Rβ2胞外段基因;应用T-A克隆技术和亚克隆技术,构建骨架为GV140的人gp130-IL-12Rβ2胞外段融合蛋白基因真核表达载体.结果 PCR扩增得到人gp130胞外段基因,IL-12Rβ2胞外段基因和gp130-IL-12Rβ2胞外段融合蛋白基因片段,克隆得到重组体GV 140-gp 130-IL-12Rβ2,测序验证了重组体的准确性.结论 成功构建了人gp130-IL-12Rβ2胞外段融合蛋白基因真核表达载体.
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关 键 词: | IL-35 gp130 IL-12Rβ2 真核表达载体 融合基因 |
Cloning of human gp130-IL-12Rβ2 extracellular fragment fusion protein and construction of eukaryotic expression vector |
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Abstract: | |
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