长萼堇菜叶蛋白水解物的制备及其活性分析

以长萼堇菜(Viola inconspicua Blume)为材料，优选碱提酸沉法参数，提取其叶蛋白；采用酶法制备叶蛋白水解物；利用超滤法分离叶蛋白水解物组分，分析叶蛋白水解物的抗氧化活性，并对叶蛋白水解物组分进行固相萃取脱盐、HPLC分析及其对肿瘤细胞的抑制活性和对线虫寿命影响的测试。结果表明：采用料液比、碱提pH和酸沉pH分别为1∶9、10.0和4.5的参数组合可稳定提取长萼堇菜叶蛋白；优选的3种蛋白酶(木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和风味蛋白酶)均能有效将水解物主要酶解为相对分子质量小于3.3×103的组分，并通过超滤可有效分离出相对分子质量分别为<1×103(PH1)、1×103~<3×103(PH2)和≥3×103(PH3)的3个组分；长萼堇菜蛋白水解物中PH1组分的抗氧化活性和抑肿瘤细胞活性优于其他组分；PH1和PH2延长线虫寿命的效果相近，都优于PH3。可见，长萼堇菜叶蛋白水解物组分PH1更具应用开发价值。