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橡胶树HAD家族蛋白酸性磷酸化酶基因VSP2的表达分析
引用本文:李博勋,陈奕鹏,田维敏,陈珊,黄贵修. 橡胶树HAD家族蛋白酸性磷酸化酶基因VSP2的表达分析[J]. 热带作物学报, 2016, 0(6): 1107-1114. DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2016.06.010
作者姓名:李博勋  陈奕鹏  田维敏  陈珊  黄贵修
作者单位:1. 中国热带农业科学院橡胶研究所 农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室 海南儋州 571737;中国热带农业科学院环境与植物保护研究所 农业部热带作物有害生物综合治理重点实验室 海南省热带农业有害生物监测与控制重点实验室 海南海口 571101;2. 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所 农业部热带作物有害生物综合治理重点实验室 海南省热带农业有害生物监测与控制重点实验室 海南海口 571101;3. 中国热带农业科学院橡胶研究所 农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室 海南儋州 571737
基金项目:海南省应用技术研发与示范推广专项(ZDXM2014049),农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室开放课题(RRI-KLOF1301),中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2014hzs1J002)
摘    要:
植物营养储藏蛋白VSP2是HAD家族蛋白(haloalcanoic acid dehalogenase super family,HAD)的主要成员之一。该蛋白具有酸性磷酸化酶的功能,在橡胶树氮素储存和植物凝集素防御胁迫中发挥着重要的作用。在前期研究中,利用c DNA-AFLP获得了1条与橡胶树棒孢霉落叶病抗病性相关的差异表达片段EST-IAN-24,通过Blast比对分析,发现该基因片段与其他物种的VSP2基因具有较高同源性。采用PCR和RT-PCR技术,克隆获得了一个橡胶树VSP2基因的c DNA和基因组序列,并将该基因命名为Hb VSP2。基因序列分析显示,该基因编码区全长(CDS)975 bp,含有4个内含子和5个外显子,编码324个氨基酸,推测该蛋白的分子质量为30.01 ku,等电点为4.80。该基因蛋白是HAD家族蛋白中的酸性磷酸酶,具有DXDXT基序特征。q RT-PCR定量分析发现,受多主棒孢病菌侵染后,Hb VSP2基因在橡胶树抗、感品种中的表达量存在着明显的差异,抗病品种(IAN873)的表达量显著高于感病品种(PR107),且在接种12 h达到了峰值;此外,该基因在水杨酸、茉莉酸甲酯、乙烯的处理下均能诱导其表达,对茉莉酸甲酯的敏感性明显高于其他2个激素。本研究初步表明,Hb VSP2基因可能参与橡胶树与多主棒孢病菌的互作并且与抗病性相关。

关 键 词:橡胶树  HbVSP2基因  克隆  表达分析

Expression Analysis of Haloalcanoic Acid Dehalogenase Super Family,HAD Gene HbVSP2 from Hevea brasiliensis
Abstract:
Keywords:Hevea brasiliensis  HbVSP2  Cloning  Expression analysis
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