番鸭IFN—α基因在毕赤酵母中的分泌表达 |
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引用本文: | 王春霞,王林川,鄢志强,陈庆华,王政.番鸭IFN—α基因在毕赤酵母中的分泌表达[J].中国兽医科技,2003,33(7):44-48. |
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作者姓名: | 王春霞 王林川 鄢志强 陈庆华 王政 |
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摘 要: | 利用PCR从质粒pGEM-T Easy/MDIFN扩增出番鸭IFN-α基因cDNA,将其插入到舍AOXI启动子和α分泌信号肽序列的Pichia pastoris表达载体pPICZαC3.6kb中,测序,待其结果正确后,将重组质粒转化至酵母X-33,PCR法筛选出Mut^ 表型的转化子置于BMMY培养基中培养。用5mL/L甲醇诱导表达4d后,经SDS-PAGE分析可见1条约25ku的清晰蛋白条带。试验结果表明pPICZαC3.6kb/MD IFN质粒构建成功,并且实现重组酵母高效分泌表达。
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关 键 词: | 番鸭 IFN-α基因 毕赤酵母 基因表达 干扰素 基因工程 |
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