| 牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的截短表达与鉴定 |
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| 引用本文： | 李娇,薛飞,朱远茂,祖立闯.牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的截短表达与鉴定[J].中国预防兽医学报,2008,30(3):200-205. |
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| 作者姓名： | 李娇 薛飞 朱远茂 祖立闯 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/大动物传染病研究室,黑龙江,哈尔滨,150001
2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/大动物传染病研究室,黑龙江,哈尔滨,150001;东北农业大学,黑龙江,哈尔滨,150030 |
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| 摘 要： | 利用牛病毒性腹泻病毒（BVDV）BA株接种MDBK细胞，提取病毒RNA。参照已发表的BVDV基因组序列，利用Oligo6生物学软件设计扩增E2基因的1对引物，引入酶切位点并去掉E2蛋白的跨膜区及疏水区。通过RT-PCR扩增了长约1000bp的E2基因片段，克隆到pMD18-T载体上，酶切并测序鉴定。然后将目的片段进一步定向克隆到pET30a表达载体，转化BL21表达菌。取转化菌培养，并用IPTG诱导，获得了以包涵体形式表达的重组蛋白。将重组蛋白变性、纯化和复性后，用免疫印迹与间接ELISA检测表明纯化的重组蛋白具有良好的免疫原性，为牛病毒性腹泻病毒诊断试剂的研制奠定了基础。
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| 关 键 词： | 牛病毒性腹泻病毒 E2蛋白 截短表达 鉴定 病毒 性腹泻 蛋白变性 截短 表达与鉴定 Escherichia coli virus diarrhea viral bovine protein characterization 诊断试剂 免疫原性 纯化和复性 检测 ELISA 免疫印迹 重组蛋白 形式表达 |
| 文章编号： | 1008-0589（2008）03-0200-05 |
| 收稿时间： | 2007-09-23 |
| 修稿时间： | 2007年9月23日 |
Expression and characterization of truncate E2 protein of bovine viral diarrhea virus in Escherichia coli |
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| LI Jiao,XUE Fei,ZHU Yuan-mao,ZU Li-chuang.Expression and characterization of truncate E2 protein of bovine viral diarrhea virus in Escherichia coli[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2008,30(3):200-205. |
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| Authors: | LI Jiao XUE Fei ZHU Yuan-mao ZU Li-chuang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | bovine viral diarrhea virus E2 protein prokaryotic expression |
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