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| 模拟感染家蚕微粒子病的PCR分子诊断技术研究（11） | |
| 引用本文： | 刘吉平,曹阳,Smith J.E,徐兴耀. 模拟感染家蚕微粒子病的PCR分子诊断技术研究（11）[J]. 中国农业科学, 2004, 37(12): 1925-1931 |
| 作者姓名： | 刘吉平 曹阳 Smith J.E 徐兴耀 |
| 作者单位： | 1. 华南农业大学蚕学分子生物学与生物技术实验室,广州,510642 2. Leeds大学生物学院,英国利兹市,LS2 9JT |
| 基金项目： | 英国DIFD项目(CTN992-253)，广东省科技攻关项目(C50209) |
| 摘 要： | 家蚕微粒子病病原为桑蚕微孢子虫(Nosema bombycis Nageli, N.b)。本文根据文献报道,选用了一对根据N.b孢子及其相近种属微孢子虫的SSU-rRNA保守区段设计的有效引物VIF/530R,从模拟感染不同浓度N.b孢子(3×101-7/ml)的蚕蛾、蚕卵的角度,较系统地研究了PCR诊断技术的可检测灵敏度和对模拟感染家蚕微粒子病的诊断效果,为PCR分子诊断家蚕微粒子病的实用化研究提供参考。在本实验的DNA制备方法和PCR反应条件下,分别对由不同浓度N.b纯孢子抽提的DNA模板和不同浓度N.b纯孢子(3×101～7ml-1)分别与蚕卵、蚕蛾混合抽提的DNA模板进行PCR扩增检测。结果表明:(1)对N.b纯孢子DNA模板,PCR可检测灵敏度为3×104N.bml-1(弱检测信号可到3102～3N.bml-1),对模拟染毒N.b孢子的蚕蛾DNA模板,PCR可检测灵敏度为3×105N.bml-1,两者分别已超过或达到目前生产上用显微镜的检毒水平;(2)对模拟染毒N.b孢子的蚕卵DNA模板,VIF/530R引物不能有效地检出蚕卵中染毒的N.b孢子DNA信号,推测在蚕卵DNA抽提物里可能含有抑制PCR扩增的未明因素,而蚕蛾DNA抽提物里则无此抑制因素。 |
| 关 键 词： | 家蚕 微粒子病 桑蚕微孢子虫 PCR诊断 |
| 收稿时间： | 2003-10-08 |
Studies on the Application of PCR Molecular Diagnosis to Silkworms with Simulated Pebrine Disease |
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| LIU Ji-ping,CAO Yang,Smith J. E.,XU Xing-yao. Studies on the Application of PCR Molecular Diagnosis to Silkworms with Simulated Pebrine Disease[J]. Scientia Agricultura Sinica, 2004, 37(12): 1925-1931 | |
| Authors: | LIU Ji-ping CAO Yang Smith J. E. XU Xing-yao |
| Affiliation: | LIU Ji-ping1,CAO Yang1,Smith J. E.2,XU Xing-yao1 |
| Abstract: | |
| Keywords: | Bombyx mori Pebrine disease Nosema bombycis PCR diagnosis |
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