| H9N2亚型禽流感病毒NS1A融合基因的克隆表达及抗体的制备 |
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| 引用本文： | 王坤,张玉静,孙兆增,颜瑞清,张蕾.H9N2亚型禽流感病毒NS1A融合基因的克隆表达及抗体的制备[J].吉林农业大学学报,2007,29(3):318-321. |
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| 作者姓名： | 王坤 张玉静 孙兆增 颜瑞清 张蕾 |
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| 作者单位： | 1. 吉林大学畜牧兽医学院,长春,130062;长春市药品检验所,长春,130062
2. 吉林大学畜牧兽医学院,长春,130062 |
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| 摘 要： | 应用重叠PCR的方法获得NS1A融合基因片段,并将融合基因片段成功地插入pET-20b原核表达载体,将阳性重组质粒转化表达受体菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达。进行表达产物的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blotting检测,结果表明NS1A融合基因获得高效表达,薄层扫描分析表明表达蛋白占菌体蛋白的15%。大量培养NSIA工程菌,用侧带法纯化蛋白后对日本大耳白兔进行常规免疫,应用间接ELISA测定抗体的效价达1∶25 600,为下一步NS1A融合基因真核表达产物的检测奠定基础。
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| 关 键 词： | 禽流感病毒 NS1A融合基因 克隆 原核表达 |
| 文章编号： | 1000-5684（2007）03-0318-04 |
| 修稿时间： | 2006-06-102007-01-08 |
Cloning Expression and Antibody Preparation of Fused Gene NS1A of H9N2 Subtype Avian Influenza Virus |
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| WANG Kun,ZHANG Yu-jing,SUN Zhao-zeng,YAN Rui-qing,ZHANG Lei.Cloning Expression and Antibody Preparation of Fused Gene NS1A of H9N2 Subtype Avian Influenza Virus[J].Journal of Jilin Agricultural University,2007,29(3):318-321. |
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| Authors: | WANG Kun ZHANG Yu-jing SUN Zhao-zeng YAN Rui-qing ZHANG Lei |
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| Institution: | 1. College of Animal Science and Veterinary Medicine, Jilin University, Changchun 130062, China; 2. Changchun Drug Inspection Institute, Changchun 130062, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | avian influenza virus fused gene NS1A cloning prokaryotic expression |
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