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猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因疫苗的构建及其在Marc-145细胞中的表达
引用本文:希尼尼根,程安春,汪铭书,陈希文,豆文波,李雪梅,刘伍梅,刘菲,张平英,陈孝跃. 猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因疫苗的构建及其在Marc-145细胞中的表达[J]. 中国兽医学报, 2008, 28(3): 223-226
作者姓名:希尼尼根  程安春  汪铭书  陈希文  豆文波  李雪梅  刘伍梅  刘菲  张平英  陈孝跃
作者单位:1. 四川农业大学动物科技学院动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川,雅安,625014;内蒙古农业大学动物科学与医学院,内蒙古,呼和浩特,010018
2. 四川农业大学动物科技学院动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川,雅安,625014
基金项目:教育部跨世纪优秀人才培养计划 , 四川省科技攻关项目 , 四川省重点学科建设项目
摘    要:
根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)LV和VR-2332株的核苷酸序列,设计合成了1对特异性引物,对PRRSV四川分离株SC1和SC2进行RT-PCR,扩增出病毒ORF5基因。利用真核表达质粒pcDNA3.1(+)成功构建了PRRSV四川分离株ORF5基因疫苗pcDNA-PRRSV-SC1-ORF5和pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5。通过脂质体转染法和电穿孔转染法将pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5转染Marc-145细胞,间接免疫荧光技术跟踪监测ORF5基因的表达情况,结果表明,脂质体转染法和电穿孔转染法分别在转染26h和23h后检测到ORF5基因特异性表达产物,且随着培养时间的延长,特异性表达产物增多,两者均在56h达到高峰;这证明pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5在Mare-145细胞中已高效表达,为PRRSV基因疫苗在临床上应用提供了实验依据。

关 键 词:PRRSV  ORF5  基因疫苗  Marc-145细胞  猪繁殖与呼吸综合征  病毒  基因疫苗  细胞  高效表达  cell line  eukaryotic expression  gene  plasmid  实验  应用  临床  基因特异性表达  延长  培养时间  检测  结果  情况  跟踪监测  间接免疫荧光技术
文章编号:1005-4545(2008)03-0223-04
修稿时间:2006-04-18

Construction of eukaryotic expression plasmid of PRRSV-ORF5 gene and its expression in Marc-145 cell line
Xininigen,CHENG An-chun,WANG Ming-shu,CHEN Xi-wen,DOU Wen-bo,LI Xue-mei,LIU Wu-mei,LIU Fei,ZHANG Ping-ying,CHEN Xiao-yue. Construction of eukaryotic expression plasmid of PRRSV-ORF5 gene and its expression in Marc-145 cell line[J]. Chinese Journal of Veterinary Science, 2008, 28(3): 223-226
Authors:Xininigen  CHENG An-chun  WANG Ming-shu  CHEN Xi-wen  DOU Wen-bo  LI Xue-mei  LIU Wu-mei  LIU Fei  ZHANG Ping-ying  CHEN Xiao-yue
Abstract:
Keywords:
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