大鼠体内三聚氰胺及其代谢物双波长HPLC检测方法的建立

建立双波长高效液相色谱法同时检测不同给药剂量组大鼠体内三聚氰胺、三聚氰酸和尿酸含量的方法。采用C18色谱柱,流动相为0.5mmol/L磷酸盐(pH 7.4)-甲醇(95∶5,V/V),流速1.0mL/min,检测波长三聚氰胺和三聚氰酸为213nm,尿酸为285nm,进样量10μL,柱温25℃。样品用0.6mol/L高氯酸沉淀蛋白质。结果表明,三聚氰胺、三聚氰酸、尿酸分别在0.10~1.00×10~2、0.50~1.00×10~2、0.20~1.00×10~2μg/mL范围内线性关系良好(r=0.999 9),最低检出限分别为2.50×10~(-2)、7.50×10~(-2)、3.00×10~(-2)μg/mL,平均回收率在90.99%~96.09%之间,相对标准偏差在0.84%~1.40%之间。该方法操作简便、灵敏度高、结果准确可靠,可用于动物体内三聚氰胺、三聚氰酸及尿酸同时检测和分析。