猪胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅱ蛋白的间接ELISA检测 |
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引用本文: | 谢碧林,李超美,王芳,宋艳华,何孔旺.猪胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅱ蛋白的间接ELISA检测[J].江苏农业科学,2013,41(1):40-42. |
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作者姓名: | 谢碧林 李超美 王芳 宋艳华 何孔旺 |
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作者单位: | 1. 江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京210014;福建省莆田市畜牧兽医局,福建莆田351100 2. 南京出入境检验检疫局,江苏南京,210001 3. 江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京,210014 |
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基金项目: | 国家质检总局科技计划项目(编号:2009IK018) |
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摘 要: | 为了建立快速检测猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropeumoniae)抗体的间接ELISA方法,将质粒pET-rApxⅡ转化至BL21,IPTG诱导表达毒素rApxⅡ融合蛋白,经亲和层析纯化后的蛋白作为检测抗原.对ELISA各检测条件进行优化,结果显示,抗原最适包被浓度为10 μg/mL,血清最佳稀释度为1:80.用建立的ELISA方法对猪链球菌、多杀性巴氏杆菌、猪副嗜血杆菌、大肠杆菌阳性血清进行检测,均无交叉反应.利用建立的ELISA方法从172份临床血清样本中检测出84份阳性血清样本,而利用Cps-ELISA试剂盒检测到74份阳性样品,本方法检测总符合率达83%.
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关 键 词: | 胸膜肺炎放线杆菌 ApxⅡ 间接ELISA 检测方法 |
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