| 牛坏死杆菌43K OMP多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 贺显晶,王志慧,张爱辉,蒋剑成,张思瑶,王丽娜,肖佳薇,孙东波,郭东华.牛坏死杆菌43K OMP多克隆抗体的制备[J].黑龙江八一农垦大学学报,2019,31(3). |
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| 作者姓名： | 贺显晶 王志慧 张爱辉 蒋剑成 张思瑶 王丽娜 肖佳薇 孙东波 郭东华 |
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| 作者单位： | 黑龙江八一农垦大学,大庆,163319;黑龙江八一农垦大学,大庆,163319;黑龙江八一农垦大学,大庆,163319;黑龙江八一农垦大学,大庆,163319;黑龙江八一农垦大学,大庆,163319;黑龙江八一农垦大学,大庆,163319;黑龙江八一农垦大学,大庆,163319;黑龙江八一农垦大学,大庆,163319;黑龙江八一农垦大学,大庆,163319 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;国家重点研发计划 |
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| 摘 要： | 为了评价牛坏死杆菌外膜蛋白43K OMP的免疫原性,试验利用大肠杆菌原核表达系统对牛坏死杆菌43K OMP基因进行表达,纯化目的蛋白免疫兔,制备牛坏死杆菌43K OMP多克隆抗体,并对其进行鉴定。对基因序列进行预测分析后,针对大肠杆菌稀有密码子优化合成该基因序列,克隆至pET-32a原核表达载体上,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达及镍柱进行纯化,获得重组蛋白大小约为59 ku。重组蛋白经Western blotting鉴定后免疫兔,制备多克隆抗体。Western blot检测牛坏死杆菌43K OMP多克隆抗体与43K OMP重组蛋白具有很好的免疫原性。研究成功制备了牛坏死杆菌43K OMP多克隆抗体,为以43K OMP蛋白为基础的疫苗研究奠定基础。
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| 关 键 词： | 坏死杆菌 43KOMP 原核表达 |
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