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抗冻基因CBF_2表达载体构建及转化紫花苜蓿的研究
引用本文:刘晓静,郝凤,张德罡,毛娟,于铁峰. 抗冻基因CBF_2表达载体构建及转化紫花苜蓿的研究[J]. 草业学报, 2011, 20(2)
作者姓名:刘晓静  郝凤  张德罡  毛娟  于铁峰
作者单位:甘肃农业大学草业学院;草业生态系统教育部重点实验室中-美草地畜牧业可持续发展研究中心;甘肃农业大学农学院;
基金项目:甘肃省农牧厅生物技术专项(GNSW-2004-07)资助
摘    要:本研究以拟南芥基因组DNA为模板,用PCR方法扩增目的基因,连接到PGEM-T Easy Vector载体上构建成克隆载体T-CBF2。用BamHⅠ和SacⅠ分别对克隆载体T-CBF2和植物表达载体PBI121进行双酶切,获得目的片段和线性质粒。在T4DNA连接酶的作用下进行定向连接,构建成植物表达载体P-T-CBF2。采用直接转化法将重组子导入根癌农杆菌EHA105。经PCR鉴定,重组质粒已成功导入根癌农杆菌中。通过农杆菌介导法转化和田苜蓿,现在已经得到转基因的苜蓿愈伤组织。

关 键 词:抗冻基因CBF2  载体构建  农杆菌  紫花苜蓿  转化  

Construction of antifreeze gene CBF_2 expression vector and transformation into alfalfa callus
LIU Xiao-jing,HAO Feng,ZHANG De-gang,MAO Juan,YU Tie-feng. Construction of antifreeze gene CBF_2 expression vector and transformation into alfalfa callus[J]. Acta Prataculturae Sinica, 2011, 20(2)
Authors:LIU Xiao-jing  HAO Feng  ZHANG De-gang  MAO Juan  YU Tie-feng
Affiliation:LIU Xiao-jing1,2,HAO Feng1,ZHANG De-gang1,MAO Juan3,YU Tie-feng1,2(1.College of Grassland Science,Gansu Agricultural University,Lanzhou 730070,China,2.Key Laboratory of Grassland Ecosystem of Ministry of Education,Sino-U.S.Centers for Grazing land Ecosystem Sustainability,3.College of Agronomy,China)
Abstract:
Keywords:antifreeze gene CBF2  vector construction  Agrobacterium tumefaciens  Medicago sativa  transformation  
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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