草鱼APN基因的克隆及表达特征 |
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作者姓名: | 冯军厂 聂国兴 刘臻 张建社 王赏初 鲁双庆 |
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作者单位: | 1. 河南师范大学生命科学学院,河南新乡 453007;长沙学院生物工程与环境科学系,湖南长沙410003 2. 河南师范大学生命科学学院,河南新乡,453007 3. 长沙学院生物工程与环境科学系,湖南长沙,410003 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(31001114); 湖南省高校产业化培育项目(10CY017); 河南省高校科技创新杰出人才项目(2010HASTIT020) |
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摘 要: | 氨肽酶N(APN)是肽酶M1家族的成员之一,在蛋白质的消化中发挥重要作用。采用同源克隆和RACE技术首次克隆草鱼APN基因的全长cDNA序列。该cDNA全长为3258bp,包含27bp的5UTR序列,552bp的3UTR序列,2679bp开放阅读框,编码892个氨基酸;草鱼与斑马鱼基因同源性和编码氨基酸同源性分别为81.5%和75.4%,与其他动物同源性分别为58.8%~61.2%和54.3%~60.2%。经预测,其编码蛋白的分子量为100.61ku,等电点为5.14,该蛋白具有与哺乳动物十分相似的1个螺旋跨膜结构,但跨膜区氨基酸同源性较低;系统进化分析表明,草鱼APN基因与斑马鱼的亲缘关系最近;利用Real-timePCR技术检测了该基因的发育表达,结果显示草鱼出膜4d后APNmRNA表达量相对稳定;APN在草鱼前肠、中肠和后肠均有较高的表达量,以前肠组织表达量最高;昼夜节律研究发现,肠道APN基因06:00-18:00的表达量较18:00-06:00高。
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关 键 词: | 草鱼 APNcDNA 分子特征 mRNA表达模式 |
收稿时间: | 2011-10-14 |
修稿时间: | 2012-02-15 |
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