家蚕蜕皮激素受体和超气门蛋白基因的诱导表达模式及蜕皮激素响应元件核心保守区的识别 |
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引用本文: | 刘云垒,杜杰,赵晓明,苏琳瑛,卫正国,李兵,虞晓华,沈卫德.家蚕蜕皮激素受体和超气门蛋白基因的诱导表达模式及蜕皮激素响应元件核心保守区的识别[J].蚕业科学,2016,42(3). |
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作者姓名: | 刘云垒 杜杰 赵晓明 苏琳瑛 卫正国 李兵 虞晓华 沈卫德 |
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作者单位: | 苏州大学基础医学与生物科学学院,江苏苏州,215123;苏州大学基础医学与生物科学学院,江苏苏州215123;现代丝绸国家工程实验室,江苏苏州215123 |
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基金项目: | 现代农业产业技术体系建设专项 |
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摘 要: | 核受体基因家族是介导昆虫蜕皮激素(20E)作用的关键信号分子。为了研究家蚕丝腺中核受体异源二聚体编码基因——蜕皮激素受体基因Bm EcR和超气门蛋白基因Bm USP的表达模式,应用实时荧光定量PCR技术检测家蚕5龄幼虫正常状态下和用2×10~(-3)μg/μL蜕皮激素处理后Bm EcR与Bm USP在丝腺组织中的表达变化。结果表明,20E处理后,Bm EcRA、Bm EcR-B1和Bm USP在中、后部丝腺的表达量与对照组相比均有不同程度增加,说明20E能够促进Bm EcR-A、Bm EcR-B1和Bm USP基因的表达;但中部丝腺与后部丝腺Bm EcR-A、Bm EcR-B1和Bm USP基因的表达变化趋势不同。利用等温滴定量热技术(ITC)获得的家蚕蜕皮激素受体结构域蛋白Bm EcR-B1D与蜕皮激素响应元件Bm E75A-EcRE及其缺失突变体相互作用的亲和力常数(K)、反应热(ΔH)和熵(ΔS),显示了Bm EcR-B1D蛋白能够与Bm E75A-EcRE进行结合,并发现Bm E75A-EcRE的核心保守区为编码序列TCTTC,推测该区域有可能是Bm EcR-B1D蛋白结合在Bm E75A-EcRE上的精确位点。
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关 键 词: | 家蚕 蜕皮激素受体 超气门蛋白 响应元件 实时荧光定量PCR 等温滴定量热技术 |
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