新牧4号紫花苜蓿原生质体游离和培养条件的研究

主要探讨影响苜蓿原生质体游离和培养的条件，为原生质体的培养体系的建立提供了依据。以‘新牧4号紫花苜蓿’的子叶、下胚轴和愈伤组织为材料，研究了酶液的pH值，酶解时间，酶液组合和不同培养方法对原生质体游离和培养效果的影响。结果表明：当酶液pH值为5.8时，有活力的原生质体的产量最高，同时细胞碎片少；子叶、下胚轴和愈伤组织适宜的酶解时间均为10 h；酶液组合为2%纤维素酶＋0.5%果胶酶＋0.3%或0.5%离析酶，游离出的有活力的原生质体产量较高；采用液体浅层培养和固液双层培养，均观察到原生质体发生分裂，但固液双层培养法更有利于‘新牧4号紫花苜蓿’原生质体的分裂和培养。