鸭三种病毒性疾病多重PCR检测方法的建立及初步应用 |
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引用本文: | 李海琴,傅光华,黄江南,傅秋玲,谢金防,程龙飞,黄瑜,韦启鹏.鸭三种病毒性疾病多重PCR检测方法的建立及初步应用[J].福建农业学报,2018(7). |
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作者姓名: | 李海琴 傅光华 黄江南 傅秋玲 谢金防 程龙飞 黄瑜 韦启鹏 |
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作者单位: | 江西省农业科学院畜牧兽医研究所;福建省农业科学院畜牧兽医研究所 |
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摘 要: | 为了一次性检测临床样品中是否存在鸭新城疫病毒(NDV)、鸭瘟病毒(DPV)或鸭坦布苏病毒(DTMUV)感染,本研究根据GenBank已登录的3种病原的保守基因序列,分别设计了3对特异性引物,通过优化扩增条件,建立了可同时检测NDV、DPV和DTMUV的多重PCR检测方法。特异性检验表明,该多重PCR方法可同时扩增出NDV(510bp)、DPV(400bp)、DTMUV(300bp)的特异片段,对其他鸭常感染病毒扩增结果均为阴性;敏感性测定表明,该多重PCR技术最低能检出1.02×10~4拷贝·μL~(-1) NDV、3.50×10~3拷贝·μL~(-1) DPV和1.17×10~4拷贝·μL~(-1) DTMUV。采用建立的多重PCR方法对250份临床样品进行检测结果显示,其检测结果与该3种病毒的常规单一PCR检测结果符合率为100%。以上结果表明,本研究建立的多重PCR检测方法具有快速、特异性强、敏感性高等优点,适用于临床样品中上述3种病原的检测。
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