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马铃薯甲虫热激蛋白基因Ld-hsp90的克隆及温度胁迫下的表达
引用本文:蒋健,李祥瑞,张云慧,郭文超,程登发,郭青云.马铃薯甲虫热激蛋白基因Ld-hsp90的克隆及温度胁迫下的表达[J].植物保护学报,2013,40(5):399-406.
作者姓名:蒋健  李祥瑞  张云慧  郭文超  程登发  郭青云
作者单位:中国农业科学院植物保护研究所, 植物病虫害生物学国家重点实验室, 北京 100193;青海省农林科学院 植物保护研究所, 西宁 810016;中国农业科学院植物保护研究所, 植物病虫害生物学国家重点实验室, 北京 100193;中国农业科学院植物保护研究所, 植物病虫害生物学国家重点实验室, 北京 100193;新疆农业科学院植物保护研究所, 乌鲁木齐 830091;中国农业科学院植物保护研究所, 植物病虫害生物学国家重点实验室, 北京 100193;青海省农林科学院 植物保护研究所, 西宁 810016
基金项目:公益性行业(农业)科研专项(201103026-2)
摘    要:马铃薯甲虫Leptinotarsa decemlineata是一种抗逆性极强的世界性检疫害虫,对温度胁迫具有很强的适应性,为进一步明确其对温度胁迫适应性的分子生态机制,采用RT-PCR及RACE技术克隆得到了1个hsp90基因的cDNA全长序列,命名为Ld-hsp90,并利用实时荧光定量PCR技术检测其在温度胁迫后相对表达量的变化。Ld-hsp90全长为2 489 bp,开放阅读框(ORF)长度为2 160 bp,编码719个氨基酸,理论等电点为4.98,分子量约为82.09 kD,5'端与3'端非编码区长度分别为113 bp和216 bp。氨基酸序列中含有HSP90家族的5个签名序列及胞质特征序列MEEVD。实时荧光定量PCR检测结果显示:38℃和44℃高温热激1 h,马铃薯甲虫成虫体内的Ld-hsp90的表达量均显著高于对照组,而0℃与-10℃低温处理1 h后的表达量与对照组均无显著差异。研究表明Ld-hsp90的上调表达在马铃薯甲虫抗高温中起着重要的作用。

关 键 词:马铃薯甲虫  热激蛋白90  基因克隆  生物信息学分析  实时荧光定量PCR
收稿时间:2013/3/22 0:00:00

cDNA cloning of heat shock protein 90 (Ld-hsp90) in Leptinotarsa decemlineata (Coleoptera: Chrysomelidae) and its expression under temperature stress
Jiang Jian,Li Xiangrui,Zhang Yunhui,Guo Wenchao,Cheng Dengfa and Guo Qingyun.cDNA cloning of heat shock protein 90 (Ld-hsp90) in Leptinotarsa decemlineata (Coleoptera: Chrysomelidae) and its expression under temperature stress[J].Acta Phytophylacica Sinica,2013,40(5):399-406.
Authors:Jiang Jian  Li Xiangrui  Zhang Yunhui  Guo Wenchao  Cheng Dengfa and Guo Qingyun
Institution:Institute of Plant Protection, Chinese Academy of Agricultural Sciences, State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Beijing 100193, China;Institute of Plant Protection, Qinghai Academy of Agriculture and Forestry Sciences, Xining 810016, Qinghai Province, China;Institute of Plant Protection, Chinese Academy of Agricultural Sciences, State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Beijing 100193, China;Institute of Plant Protection, Chinese Academy of Agricultural Sciences, State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Beijing 100193, China;Institute of Plant Protection, Xinjiang Academy of Agricultural Sciences, Urumqi 830091, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China;Institute of Plant Protection, Chinese Academy of Agricultural Sciences, State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Beijing 100193, China;Institute of Plant Protection, Qinghai Academy of Agriculture and Forestry Sciences, Xining 810016, Qinghai Province, China
Abstract:
Keywords:Leptinotarsa decemlineata  heat shock protein 90  molecular cloning  bioinformations analysis  real-time PCR
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