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| 尼罗罗非鱼绿色荧光蛋白/GH融合表达载体的构建及其在NIH293T细胞中的表达 | |
| 引用本文： | 王茂元,张平,邹芝英,李大宇,杨弘.尼罗罗非鱼绿色荧光蛋白/GH融合表达载体的构建及其在NIH293T细胞中的表达[J].中国农学通报,2011,27(7):385-389. |
| 作者姓名： | 王茂元 张平 邹芝英 李大宇 杨弘 |
| 作者单位： | 1. 福建省淡水水产研究所,福州,350002 2. 睢宁县水产技术指导站,江苏睢宁,221200 3. 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心,农业部淡水鱼类遗传育种和养殖生物学重点开放实验室,江苏无锡,214081 |
| 基金项目： | 国家科技支撑计划专题，2007年公益性行业(农业)科研专项，"国家重点基础研究发展计划973计划"项目，国家罗非鱼产业技术体系 |
| 摘 要： | 从尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)脑垂体中分离其总RNA，经反转录合成为第一条cDNA链，再以第一条cDNA为模板，经过RT-PCR，克隆得到全长785bp的生长激素基因，序列分析表明：GH开放阅读框为615bp，共编码204个氨基酸；其中含有17个氨基酸的信号肽和187个氨基酸的成熟GH序列。同时我们将其插入到载体启动子下游，与增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein，EGFP)报告基因融合，重组质粒经菌液PCR、限制性内切酶酶切和测序进行鉴定。通过脂质体转染分别将pEGFP-GH重组表达载体、pEGFP-N1转到293T细胞中，以检测尼罗罗非鱼GH基因表达的活性。结果显示，阳性对照组pEGFP-N1，有荧光表达的细胞占90%以上；pEGFP-GH可见绿色荧光，但是有荧光表达的细胞较少，强度较弱。上述实验现象表明，所获得的尼罗罗非鱼GH基因具有较好的表达活性，能够在真核细胞中表达。 |
| 关 键 词： | 生物质秸秆资源 生物质秸秆资源 发电 综合效益 |
| 收稿时间： | 2010/10/18 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2010/12/1 0:00:00 |
Construction of pEGFP/GH Expression Vector of Nile Tilapia and Expression of GG/EGFP in NIH293T Cells |
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| Wang Maoyuan,Zhang Ping,Zou Zhiying,Li Dayu,Yang Hong.Construction of pEGFP/GH Expression Vector of Nile Tilapia and Expression of GG/EGFP in NIH293T Cells[J].Chinese Agricultural Science Bulletin,2011,27(7):385-389. | |
| Authors: | Wang Maoyuan Zhang Ping Zou Zhiying Li Dayu Yang Hong |
| Institution: | Wang Maoyuan 1,Zhang Ping 2,Zou Zhiying 3,Li Dayu 3,Yang Hong 3 (1 Fujian Institute of Aquatic Product in Freshwater,Fuzhou 350002,2 Jiangsu Suining Fishery Instructor Station,Suining Jiangsu 221200,3 Open Laboratory of Genetic Breeding of Aquatic Animals & Aquaculture Biology,Ministry of Agriculture,Freshwater Fisheries Research Center,Wuxi Jiangsu 214081) |
| Abstract: | |
| Keywords: | Oreochromis niloticus growth hormone gene fluorescent protein transfection |
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