| 快速微量提取番茄DNA及SSR-PCR反应体系的优化 |
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| 引用本文： | 贾俊忠,田丽萍,位江静,张超,魏亦农,吴晓刚,薛林.快速微量提取番茄DNA及SSR-PCR反应体系的优化[J].北方园艺,2010(8):113-115. |
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| 作者姓名： | 贾俊忠 田丽萍 位江静 张超 魏亦农 吴晓刚 薛林 |
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| 作者单位： | 石河子大学,生命科学学院,新疆,石河子,832000;石河子大学,药学院,新疆,石河子,832000;新疆石河子蔬菜研究所 |
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| 基金项目： | 国家"十一五"科技支撑计划资助项目 |
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| 摘 要： | 以番茄叶片为试材,采用改进的CTAB法,电钻研磨,提取过程中加入醋酸铜,设计4因素3水平的正交试验对PCR反应体系进行优化,同时利用梯度PCR对退火温度进行选择选择。结果表明:优化的10μL反应体系含:1×buffer,1.2 mmol/L Mg2+,1.5 mmol/L dNTPs,1.2μmol/L引物,0.75 UTaqDNA聚合酶,10 ng模板DNA。扩增程序为:94℃预变性2 min;94℃变性30 s,49.2℃退火30 s,68℃延伸30 s,共35个循环;最后72℃延伸8 min。优化的反应体系可以用于SSR分子标记机的研究,在所有SSR引物中基本都能有效扩增;改进的CTAB法提取的DNA纯度更高。
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| 关 键 词： | 番茄 DNA微量提取 PCR反应体系优化 分子标记 |
Rapid Micro-Extraction of Tomato DNA and SSR-PCR Reaction System Optimization |
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