小鹅瘟病毒荧光RPA恒温快速检测方法的建立与应用 |
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引用本文: | 高远,徐龙涛,冯宗玲,李本科. 小鹅瘟病毒荧光RPA恒温快速检测方法的建立与应用[J]. 中国兽药杂志, 2022, 56(3): 1-10 |
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作者姓名: | 高远 徐龙涛 冯宗玲 李本科 |
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作者单位: | 荣成市畜牧业发展中心,,,滨州市农业技术推广中心 |
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基金项目: | 山东省重点研发计划(重大科技创新工程)项目(2019JZZY010720) |
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摘 要: | 旨在建立一种以重组酶聚合酶扩增技术(RPA)为基础的快速检测方法,用于小鹅瘟病毒的快速检测。小鹅瘟是一种常见的水禽传染病,严重危害我国养鹅业的健康发展。为了快速准确对小鹅瘟进行诊断,减少该病的危害,本研究以小鹅瘟病毒VP3基因保守片段为靶点,利用重组酶聚合酶扩增技术(RPA)建立了一种准确高效的小鹅瘟病毒RPA恒温快速检测方法,并对检测方法的灵敏度、特异性进行评价,并与传统PCR和传统RT-PCR方法进行比较。结果表明,该检测方法具有较高的灵敏度,可检测到10 copies/μL的病毒核酸;具有良好的特异性,只特异性地扩增鹅细小病毒,而与鹅副黏病毒、鹅源鸭瘟病毒、小鹅流行性感冒病毒、鹅副伤寒病毒、大肠杆菌和曲霉菌均未发生交叉反应;同时该方法重复性检测的变异系数低于6%,具有很好的重复性。阳性符合试验表明该检测方法与荧光定量PCR符合率为99%。该方法可以很好地应用于小鹅瘟的大规模临床样本检测,为小鹅瘟病毒的高通量检测和流行病学调查提供技术手段。
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关 键 词: | 小鹅瘟病毒 重组酶聚合酶扩增技术(RPA) EXO探针 恒温快速检测 |
收稿时间: | 2021-10-12 |
修稿时间: | 2022-03-03 |
Rapid Detection of Goose parvovirus based on Isothermal Recombinase Polymerase Amplification#$NBSAssay |
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Affiliation: | Animal Husbandry Development Center of Rongcheng city,,, |
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Abstract: | |
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Keywords: | Goose parvovirus Recombinase polymerase amplification (RPA) Exo probe Isothermal and Rapid detection |
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