| 无乳链球菌Sip-GAPDH嵌合核酸疫苗的制备及免疫效果评价 |
| |
| 引用本文： | 王蓓,李桂欢,鲁义善,汤菊芬,吴灶和,简纪常.无乳链球菌Sip-GAPDH嵌合核酸疫苗的制备及免疫效果评价[J].水产学报,2014,38(11):1926-1936. |
| |
| 作者姓名： | 王蓓 李桂欢 鲁义善 汤菊芬 吴灶和 简纪常 |
| |
| 作者单位： | 广东海洋大学 水产学院,广东海洋大学 水产学院,广东海洋大学 水产学院,广东海洋大学 水产学院,广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室,广东海洋大学 水产学院 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金; 国家科技支撑计划项目;广东省科技计划农业攻关项目; 广东省2012年鱼病防治专项资金 |
| |
| 摘 要： | 为了研究无乳链球菌Sip-GAPDH嵌合核酸疫苗对罗非鱼链球菌病的免疫保护作用,本研究通过PCR和重叠延伸拼接技术(SOEing)获得融合基因Sip-GAPDH,连接至真核表达载体pcDNA3.1(+)制备DNA疫苗,通过背鳍肌肉注射方式免疫吉富罗非鱼,免疫后第7、28天取样,采用PCR及RT-PCR方法检测pcDNA-Sip-GAPDH在各个组织(包括肌肉、脑、头肾、脾脏、鳃和肝脏)中的表达情况。采用ELISA、Real-time PCR法和体外攻毒法分别分析各实验组不同时间血清抗体效价、免疫基因(IgM、IL-1β和CD8)表达变化规律和相对保护率,研究该嵌合性疫苗对吉富罗非鱼的保护效果。结果显示,实验组在免疫接种第7和第28天时,注射点周围的肌肉、脑、头肾、脾脏、鳃和肝脏均能检测到嵌合性质粒,实验组罗非鱼血清抗体效价均高于对照组并于21 d时达到峰值(1∶4 096);qPCR数据表明,实验组鱼体胸腺、头肾和脾脏的IgM、IL-1β和CD8基因的mRNA表达量均出现了上调,并且在胸腺、头肾和脾脏中的表达量分别在免疫后第12和第48 h达到峰值;免疫后42 d进行人工攻毒后计算免疫保护率为93.3%。以上研究结果表明,本研究构建的无乳链球菌Sip-GAPDH嵌合核酸疫苗在罗非鱼链球菌病防治中具有潜在的应用价值。
|
| 关 键 词： | Sip-GAPDH 嵌合基因 核酸疫苗 无乳链球菌 免疫保护率 |
| 收稿时间： | 2014/5/22 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2014/10/4 0:00:00 |
Chimeric DNA vaccine development and protective immunity analysis of Sip-GAPDH of Streptococcus agalactiae isolated from tilapia(Oreochromis niloticus) |
| |
| WANG Bei,LI Guihuan,LU Yishan,TANG Jufen,WU Zaohe and JIAN Jichang.Chimeric DNA vaccine development and protective immunity analysis of Sip-GAPDH of Streptococcus agalactiae isolated from tilapia(Oreochromis niloticus)[J].Journal of Fisheries of China,2014,38(11):1926-1936. |
| |
| Authors: | WANG Bei LI Guihuan LU Yishan TANG Jufen WU Zaohe and JIAN Jichang |
| |
| Institution: | Fisheries College,Guangdong Ocean University,Fisheries College,Guangdong Ocean University,Fisheries College,Guangdong Ocean University,Fisheries College,Guangdong Ocean University,Guangdong Provincial Key Laboratory of Pathogenic Biology and Epidemiology for Aquatic Economic Animals,Fisheries College,Guangdong Ocean University |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Sip-GAPDH chimeric gene DNA vaccine Streptococcus agalactiae RPS |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《水产学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《水产学报》下载免费的PDF全文 |
|
