| 棉花农杆菌基因转化体系的优化和转苜蓿抗菌肽基因(alfAFP)植株的获得 |
| |
| 引用本文： | 张海平,王学德,邵明彦,袁淑娜,华水金,倪密.棉花农杆菌基因转化体系的优化和转苜蓿抗菌肽基因(alfAFP)植株的获得[J].农业生物技术学报,2009,17(6). |
| |
| 作者姓名： | 张海平 王学德 邵明彦 袁淑娜 华水金 倪密 |
| |
| 作者单位： | 张海平(浙江大学农业与生物技术学院农学系,杭州,310029;山西省农业科学院农作物品种资源研究所,太原,030031);王学德,邵明彦,袁淑娜,华水金,倪密(浙江大学农业与生物技术学院农学系,杭州,310029) |
| |
| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划(973)项目(No.2004CB11730502，浙江省重点科技项目，自然科学基金项目 |
| |
| 摘 要： | 为了优化根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的棉花(Gossypium hirsutumL.)下胚轴切段的基因转化体系,以苜蓿(Medicago sativa L.)抗菌肽基因(alflafa antifungul peptide,alfAFP)为目标,利用γ-葡萄糖甘酸酶基因(gus)和潮霉素抗性基因(Hpt)的检测方法,分析了根癌农杆菌菌种、菌液浓度、浸染下胚轴的时间、共培养中乙酰丁香酮(AS)的浓度、共培养温度和时间等因子对基因转化的影响.优化分析表明,用农杆菌菌株LBA4404,当OD_(600)值为0.5～0.7的菌液浸染5～7日龄的棉花无菌苗下胚轴切段10～15 min.在含200 μmol/L AS的共培养基中21℃暗培养60h,可更有效地提高转化率.经上述条件处理的下胚轴在含50 mg/L潮霉素的愈伤诱导培养基上培养3周可产生转化率最高的愈伤组织.愈伤组织经分化培养获得15株再生棉花,经过PCR和PCR-Southern分析.发现其中12株含有外源基因alfAFP.
|
| 关 键 词： | 棉花 农杆菌 基因转化 |
Optimization of Agrobacterium-mediated Cotton Gene Transformation and Obtainment of Transgenic Plants with Alflafa Antifungul Peptide Gene(alfAFP) |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | cotton Agrobacterium tumefaciens gene transformation |
| 本文献已被 万方数据 等数据库收录！ |
|
