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SjFer与GM-CSF共表达真核表达载体诱导小鼠免疫保护效果
引用本文:陈尔曼,黄复深,邱元,郝知友,袁鑫.SjFer与GM-CSF共表达真核表达载体诱导小鼠免疫保护效果[J].农业生物技术学报,2007,15(4):567-573.
作者姓名:陈尔曼  黄复深  邱元  郝知友  袁鑫
作者单位:1. 湖南农业大学动物医学院,长沙,410128
2. 湖南农业大学动物医学院,长沙,410128;湖南农业大学细胞工程重点实验室,长沙,410128
基金项目:湖南省教育厅科研项目;湖南农业大学校科研和教改项目
摘    要:根据GenBank中SjFer序列设计1对特异引物,以日本血吸虫(Schistosoma japonicum)cDNA文库为模板扩增SjFer基因,常规方法构建质粒pcDNA3.0/SjFer、pcDNA3.0/GM-CSF及pcDNA3.0/SjFer-GM-CSF。85只昆明小鼠分A、B、C、D和E组,分别于0、2和4周通过左后肢股四头肌注射生理盐水50μL/只,质粒50μg/只。感染前和每次免疫前采血收集血清,ELISA检测特异性IgG水平。末次免疫后2周每组随机宰杀小鼠5只无菌取脾,MTT法检测淋巴细胞增殖情况,取免疫部位的肌肉组织通过免疫组化检查重组质粒在小鼠肌细胞内表达情况。末次免疫后2周每只小鼠贴壁感染40±1条尾蚴,45d后宰杀观察减虫率和减卵率。结果表明,重组质粒能在小鼠肌细胞内表达;A、B和C组IgG水平变化不明显,D组和E组可诱导小鼠IgG水平升高,且E组高于D组。淋巴细胞转化试验结果A、B和C组OD570变化不明显,彼此无显著差异,D组和E组脾淋巴细胞转化率明显增加,与对照组差异显著,且E组OD570明显高于D组。D组和E组可诱导小鼠产生36.27%和39.22%的减虫率、36.10%和49.04%的减卵率。GM-CSF可增强体液和细胞免疫应答并显著增强pcDNA3.0/SjFer的免疫保护力。

关 键 词:日本血吸虫  铁蛋白基因  粒细胞集落刺激因子  DNA疫苗  免疫保护力
文章编号:1006-1304(2007-04-0567-07
收稿时间:2006-11-21
修稿时间:2006-12-27

Immunoprotection Elicited by Eucaryotic Expression Vector of Co-encoding SjFer and GM-CSF in Mice
CHEN Er-man,HUANG Fu-sheng,QIU Yuan,HAO Zhi-you,YUAN Xin.Immunoprotection Elicited by Eucaryotic Expression Vector of Co-encoding SjFer and GM-CSF in Mice[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2007,15(4):567-573.
Authors:CHEN Er-man  HUANG Fu-sheng  QIU Yuan  HAO Zhi-you  YUAN Xin
Abstract:
Keywords:Schistosoma japonicum  ferritin gene  granulocyte macrophage colony-stimulating factor(GM-CSF)  DNA vaccine  immunoprotection
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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