| 草鱼点状产气单胞菌单克隆抗体的制备与双抗原夹心ELISA法的建立 |
| |
| 作者姓名： | 马丽 康洁 |
| |
| 作者单位： | 1.商丘师范学院生命科学系,河南商丘,476000;2.商丘师范学院生命科学系,河南商丘,476000 |
| |
| 基金项目： | 河南省科技攻关项目,河南省科技厅基础与前沿研究项目 |
| |
| 摘 要： | 为了建立一种快速、准确能早期检测草鱼肠炎痛原菌的方法,以患病草鱼为材料,制备点状产气单胞菌单克隆抗体(McAb),并鉴定其特异性和抗原表位;采用过碘酸钠方法,以辣根过氧化物酶标记单抗,用试管凝集试验测定其活性;建立点状产气单胞菌McAb的双抗原夹心ELISA检测方法,确定包被单抗和酶标单抗的浓度,并测定其灵敏度和特异性.结果:1)获得了2株特异性强和抗原表位不同的单抗,其ELISA效价为1:16000.2)辣根过氧化物酶标记的抗体活性为1:640.3)建立了包被抗体稀释度为1:800、酶标抗体稀释度为1:1600的双抗原夹心ELISA检测方法,该方法与点状产气单胞菌呈强阳性反应,与近似菌无交叉反应,灵敏性为7×103fu/mL.结论:制备的点状产气单胞菌McAb的效价高、特异性强;建立的双抗原夹心ELISA方法操作简单、灵敏度高、特异性强,可应用于草鱼肠炎病原体的早期快速检测.
|
| 关 键 词： | 草鱼 点状产气单胞菌 单克隆抗体 双抗原夹心ELISA |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
