1株环境源单增李斯特菌的分离鉴定及生物特性分析

【目的】探究牦牛屠宰场中存在的单增李斯特菌对牦牛肉造成污染的风险。【方法】通过细菌分离培养、形态观察、生化试验及分子学方法对牦牛屠宰场50份污水样品中的单增李斯特菌进行分离鉴定；通过PCR方法对分离株血清型和毒力基因进行鉴定和检测，并测定分离株在不同生长条件下D_{600 nm}值；通过细胞的黏附和侵袭试验及小鼠半数致死量(LD₅₀)确定分离株的毒力。【结果】从50份污水样品中分离出1株革兰氏阳性短杆状细菌。分离株在李斯特菌显色培养基上为蓝绿色菌落，镜检为革兰氏阳性两端钝圆的短杆状菌，疑似为单增李斯特菌。生化试验结果显示，分离株可水解七叶苷，发酵葡萄糖、麦芽糖和鼠李糖，MR、VP、动力、过氧化氢酶试验为阳性，甘露醇和木糖发酵试验为阴性。系统进化树显示，分离株与单增李斯特菌EDG-e具有高度同源性，序列相似性为99%,血清型鉴定其血清型为1/2a。毒力基因检测结果显示，分离株携带inlB、inlC、inlJ、actA、plcA、prfA、mpl、hly、inlA、SigmaB毒力基因。抗应激能力试验显示，分离株在低温、强酸、强碱、高盐、乙醇胁迫和氧化...