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基于高通量测序的梅花鹿卵巢衰老的转录组分析
引用本文:林乐丰,刁云飞,范冰峰,刘理想,邵静,赵向远,许保增.基于高通量测序的梅花鹿卵巢衰老的转录组分析[J].中国畜牧兽医,2023(8):3157-3170.
作者姓名:林乐丰  刁云飞  范冰峰  刘理想  邵静  赵向远  许保增
作者单位:1. 中国农业科学院特产研究所;2. 特种经济动物分子生物学国家重点实验室;3. 吉林农业科技学院动物科技学院
基金项目:吉林省科技发展计划项目(20210202127NC);;中国农业科学院科技创新计划支持(CAAS-ASTIP-2015-ISAPS);
摘    要:【目的】获取青年梅花鹿和老年梅花鹿卵巢组织的转录组信息,为深入研究梅花鹿卵巢衰老的潜在机制提供依据。【方法】以4岁龄青年梅花鹿和10岁龄老年梅花鹿卵巢作为试验样本,对样本进行石蜡切片、苏木精-伊红染色和卵泡计数;用Trizol法提取卵巢样本RNA构建转录组文库,应用Illumina HiSeqTM2000测序平台测序,对测序结果进行差异表达基因、GO功能、KEGG通路和蛋白互作网络分析,并挑选部分差异表达基因进行实时荧光定量PCR验证。通过RIPA裂解液提取卵巢样本蛋白并对组蛋白H3赖氨酸4三甲基化(H3K4me3)蛋白在青年和老年梅花鹿中的表达情况进行Western blotting检测。【结果】组织学分析结果表明,老年梅花鹿的卵巢卵泡数显著低于青年梅花鹿(P<0.05),而闭锁卵泡数极显著高于青年梅花鹿(P<0.01)。转录组学分析结果表明,老年和青年梅花鹿卵巢间共有1 477个差异表达基因,其中表达上调基因503个,表达下调基因974个。GO功能和KEGG通路富集结果表明,免疫系统过程、转录、DNA损伤修复、炎症反应、凋亡等生物事件与卵巢衰老有关...

关 键 词:梅花鹿  卵巢衰老  RNA-Seq  H3K4me3
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