| 利用酵母单杂交筛选拟南芥AtSTK基因表达调控蛋白的研究 |
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| 引用本文： | 杨歌,惠颖,赵翠,田梦涵,任媛媛,黄占景,葛荣朝.利用酵母单杂交筛选拟南芥AtSTK基因表达调控蛋白的研究[J].华北农学报,2017,32(4). |
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| 作者姓名： | 杨歌 惠颖 赵翠 田梦涵 任媛媛 黄占景 葛荣朝 |
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| 作者单位： | 1. 河北师范大学 生命科学学院,河北 石家庄,050024;2. 石药集团 中奇制药技术有限公司,河北 石家庄,050035 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目，河北省自然科学基金项目 |
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| 摘 要： | 拟南芥丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因AtSTK的过量表达可以明显提高拟南芥的耐盐性。为进一步研究AtSTK基因表达的调控机制,以拟南芥基因组DNA为模板设计引物,扩增获得AtSTK基因的启动子序列,并构建到报告载体pAbAi,将重组报告载体质粒pAbAi-HYT利用BstbⅠ进行单酶切线性化,转化酵母菌株Y1H Gold,线性化的pAbAi-HYT整合到基因组中。然后,将纯化的拟南芥双链cDNA、pGADT7-Rec载体共转化含有报告载体pAbAi-HYT的酵母菌,将菌液涂布到含有100 ng/m L Ab A的SD/-Leu培养基上进行阳性克隆的酵母单杂交筛选。通过回复鉴定、序列测定,最终筛选获得了可能参与AtSTK基因表达调控的4个拟南芥基因。测序结果表明,酵母单杂交筛选获得的拟南芥基因AT3G32090含有WRKY转录因子保守结构域,为WRKY类转录因子的一员。因此,AtSTK基因的表达很可能接受MAPK信号传导途径中AT3G32090基因编码的WRKY类转录因子的调控,从而影响拟南芥植株的耐盐性。
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| 关 键 词： | AtSTK 启动子 表达调控蛋白 酵母单杂交 |
Study on the Expression Regulatory Proteins of Arabidopsis Gene AtSTK by Yeast One Hybrid System |
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| YANG Ge,HUI Ying,ZHAO Cui,TIAN Menghan,REN Yuanyuan,HUANG Zhanjing,GE Rongchao.Study on the Expression Regulatory Proteins of Arabidopsis Gene AtSTK by Yeast One Hybrid System[J].Acta Agriculturae Boreali-Sinica,2017,32(4). |
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| Authors: | YANG Ge HUI Ying ZHAO Cui TIAN Menghan REN Yuanyuan HUANG Zhanjing GE Rongchao |
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| Keywords: | AtSTK Promoter Expression regulatory proteins Yeast one hybrid |
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