| 层出镰刀菌T-DNA插入突变体库的构建与分析 |
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| 引用本文： | 刘丽媛,朱立华,刘力伟,王亚南,胡同乐,曹克强,王树桐. 层出镰刀菌T-DNA插入突变体库的构建与分析[J]. 河北农业大学学报, 2017, 40(1). DOI: 10.13320/j.cnki.jauh.2017.0013 |
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| 作者姓名： | 刘丽媛 朱立华 刘力伟 王亚南 胡同乐 曹克强 王树桐 |
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| 作者单位： | 河北农业大学植物保护学院,河北保定,071001 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划，河北省自然科学基金，国家苹果产业技术体系 |
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| 摘 要： | 苹果再植病害(Apple replant disease,ARD)是世界苹果主产区广泛发生的病害。前期研究表明,层出镰刀菌是造成苹果再植病害的重要致病菌之一,但其分子致病机制尚缺乏研究报道。本研究的目的是建立农杆菌介导的层出镰刀菌的遗传转化体系,并获得大规模的遗传稳定的层出镰刀菌ATMT突变体库,为研究该菌的分子致病机理奠定基础。对影响农杆菌介导转化效率的主要因子进行单因子条件测验,得到其最优转化体系为:抑制H10菌丝和孢子生长的潮霉素的浓度为100μg/mL,层出镰刀菌的分生孢子浓度为107个/mL,农杆菌OD600值为0.3,AS浓度为200μg/mL,共培养时间为48h,共培养温度为26℃。利用这一体系构建了3000个转化子的突变体库,并对随机选择的200个突变体进行潮霉素抗性基因的PCR检测,并经过在PDA培养基上5代培养,验证了T-DNA插入片段的稳定性。
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| 关 键 词： | 层出镰刀菌 农杆菌介导转化(ATMT) 苹果再植病害 突变体 |
Construction and analysis of the T-DNA insertional mutant library for Fusarium proliferatum |
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| LIU Li-yuan,ZHU Li-hua,LIU Li-wei,WANG Ya-nan,HU Tong-le,CAO Ke-qiang,WANG Shu-tong. Construction and analysis of the T-DNA insertional mutant library for Fusarium proliferatum[J]. Journal of Agricultural University of Hebei, 2017, 40(1). DOI: 10.13320/j.cnki.jauh.2017.0013 |
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| Authors: | LIU Li-yuan ZHU Li-hua LIU Li-wei WANG Ya-nan HU Tong-le CAO Ke-qiang WANG Shu-tong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Fusarium proliferatum ATMT apple replant disease mutant |
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