| 猪IL-18基因的原核表达及重组蛋白的纯化 |
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| 引用本文： | 裴仉福,陈瑞爱,温纳相,唐秀英,唐满华,朱文冠,李琳,程含波.猪IL-18基因的原核表达及重组蛋白的纯化[J].中国兽医科技,2006,36(10):842-846. |
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| 作者姓名： | 裴仉福 陈瑞爱 温纳相 唐秀英 唐满华 朱文冠 李琳 程含波 |
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| 作者单位： | [1]广东大华农动物保健品有限公司,广东新兴527439 [2]广东温氏食品集团有限公司,广东新兴527439 |
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| 摘 要： | 以pcDNA3．1-pIL-18为模板，采用PCR技术扩增到了猪白细胞介素18（IL-18）的成熟蛋白基因，通过KpnⅠ＋SacⅠ双酶切及连接反应，构建了pET32c—pIL—18原核表达质粒。经过限制性内切酶分析、PCR鉴定及DNA序列测定证实，重组质粒中的基因片段连接正确。之后，重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3），于37℃、1．0mmol／L IPTG条件下诱导表达。菌体裂解产物经SDS—PAGE分析，在分子质量约为33ku处出现了预期的目的蛋白。用8mol／L脲对表达产物变性，经Ni^2＋NTA柱纯化，透析复性，得到了纯化的IL-18蛋白。Western—blot分析证实，纯化的重组IL-18蛋白具有反应活性。上述研究结果为重组IL-18的应用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 猪白细胞介素-18基因 原核表达 蛋白纯化 |
| 文章编号： | 1673-4696（2006）10-0842-05 |
| 收稿时间： | 2006-07-19 |
| 修稿时间： | 2006-09-11 |
Prokaryotic expression of porcine interleukin-18 gene and purification of the expressed IL-18 protein |
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| PEI Zhang-fu , CHEN Rui-ai , WEN Na-xiang , TANG Xiu-ying, TANG Man-hua , ZHU Wen-guan , LI Lin , CHENG Han-bo.Prokaryotic expression of porcine interleukin-18 gene and purification of the expressed IL-18 protein[J].Chinese Journal of Veterinary Science and Technology,2006,36(10):842-846. |
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| Authors: | PEI Zhang-fu CHEN Rui-ai WEN Na-xiang TANG Xiu-ying TANG Man-hua ZHU Wen-guan LI Lin CHENG Han-bo |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | porcine interleukin-18 gene prokaryotic expression protein purification |
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