蓖麻蚕基因转录表达分析的内参基因筛选 |
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作者单位: | (1.江苏科技大学,江苏 镇江 212003;2.中国农业科学院蚕业研究所,江苏 镇江 212018) |
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基金项目: | 现代农业产业技术体系建设专项(CARS-22). |
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摘 要: | 为了筛选能够稳定表达,适合蓖麻蚕基因转录表达分析的内参基因,根据鳞翅目昆虫基因分析中常用的内参基因肌动蛋白(β-non-muscle,β-actin)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyeeraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, GAPDH)、18S rRNA、16S rRNA的序列设计特异性引物,分别对蓖麻蚕4个组织及9个不同发育时期的个体材料进行实时荧光定量PCR,制作标准曲线,采用相对定量的方法处理Ct 值,结合NormFinder 和geNorm 软件分析以上4个候选内参基因在蓖麻蚕不同组织和不同发育时期转录表达的稳定性。结果表明:β-actin 在蓖麻蚕血液、脂肪体、中肠、丝腺各组织,以及幼虫、蛹、成虫、卵各发育时期的表达最为稳定,适合作为蓖麻蚕基因转录水平研究的内参基因。
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关 键 词: | 蓖麻蚕 转录 内参基因 实时荧光定量 |
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