| 龙眼亚硫酸盐氧化酶(DlSO)基因的克隆及表达分析 |
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| 引用本文： | 帅良,李静,韩冬梅,吴振先.龙眼亚硫酸盐氧化酶(DlSO)基因的克隆及表达分析[J].果树学报,2015(1):43-50. |
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| 作者姓名： | 帅良 李静 韩冬梅 吴振先 |
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| 作者单位： | 华南农业大学园艺学院;广东省农业科学院果树研究所;广东省果蔬保鲜重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家现代农业产业技术体系(荔枝龙眼)(CARS-33-14) |
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| 摘 要： | 【目的】探讨龙眼果实亚硫酸盐氧化酶基因(DlSO)在硫残留生物降解中的作用。【方法】以龙眼总RNA为模板,采用RT-PCR结合RACE法获得龙眼亚硫酸盐氧化酶基因全长cDNA序列,命名为DlSO;运用荧光定量PCR对其表达量进行分析;使用ClontechIn-Fusion技术构建原核表达载体,使其在Rosetta(DE3)大肠杆菌中表达。【结果】DlSO序列全长1413bp,包含一个1182bp的开放阅读框,一个长37bp的5’非翻译区序列和194bp的3’非翻译区,预测编码393个氨基酸;同源性和系统进化分析结果均表明DlSO与毛果杨SO亲缘关系最近;荧光定量结果表明,在龙眼不同组织中,DlSO基因都有表达,其中在叶片中表达量最高,其次是花、幼果、根和果肉,在茎和果皮组织中DlSO基因的表达量最低;成功构建pET-32a-DlSO原核表达载体,经IPTG诱导后在Rosetta(DE3)大肠杆菌中成功表达。【结论】克隆了龙眼亚硫酸盐氧化酶基因(DlSO),并且成功构建了pET-32a-DlSO原核表达载体,经IPTG诱导在大肠杆菌中成功表达出融合蛋白,为下一步研究龙眼亚硫酸盐氧化酶的作用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 龙眼 亚硫酸盐氧化酶 基因克隆 荧光定量PCR 原核表达 |
Cloning and expression analysis of sulfite oxidase(DlSO) gene in Dimocarpus longan |
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| SHUAI Liang;LI Jing;HAN Dongmei;WU Zhenxian.Cloning and expression analysis of sulfite oxidase(DlSO) gene in Dimocarpus longan[J].Journal of Fruit Science,2015(1):43-50. |
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| Authors: | SHUAI Liang;LI Jing;HAN Dongmei;WU Zhenxian |
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| Institution: | SHUAI Liang;LI Jing;HAN Dongmei;WU Zhenxian;College of Horticulture,South China Agricultural University;Institute of Fruit Tree Research,Guangdong Academy of Agricultural Sciences;Guangdong Provincial Key Laboratory for Postharvest Science of Fruit and Vegetable; |
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