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Tsol18基因密码子优化对其表达及重组蛋白免疫效果的影响
引用本文:丁军涛,骆学农,王颖,张少华,陈晓宇,郑亚东,景志忠,才学鹏.Tsol18基因密码子优化对其表达及重组蛋白免疫效果的影响[J].畜牧兽医学报,2009,40(3).
作者姓名:丁军涛  骆学农  王颖  张少华  陈晓宇  郑亚东  景志忠  才学鹏
作者单位:1. 中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室,兰州,730046;中国农业科学院研究生院,北京,100081
2. 中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室,兰州,730046
3. 中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室,兰州,730046;甘肃农业大学,兰州,730070
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划),甘肃省重大科技专项基金 
摘    要:定点突变猪带绦虫六钩蚴(oncosphere)Tsol18基因的4个碱基,并截去其N端16氨基酸信号肽的编码序列,构建pGEX-Tsol18-sp表达载体,IPTG诱导表达后进行产物的SDS-PAGE、Western blot及稳定性分析;取该基因修饰前、后所表达的重组蛋白免疫猪,以ELISA检测抗体水平,并通过屠宰检虫评价、比较免疫效果。结果显示:修饰后的Tsol18-sp基因共有7个碱基发生同义突变,表达产物主要是约38.7 ku的可溶性融合蛋白,在4℃保存2个月后约降解20.1%,能与猪带绦虫六钩蚴阳性血清反应;TSOL18和TSOL18-sp抗原免疫试验猪后均能诱导高水平抗体的产生,但TSOL18-sp抗原的保护率较TSOL18抗原有明显的提高(100%vs 20%)。表明Tsol18经修饰后,其重组表达产物的生物学活性和稳定性都有很大改善,可作为囊虫病免疫预防的候选抗原。

关 键 词:猪带绦虫六钩蚴  Tsol18-sp  基因修饰  抗原性

Effects of Codon Optimization in Tsol18 on Its Expression and Antigenicity of the Recombinant Protein
DING Jun-tao,LUO Xue-nong,WANG Ying,ZHANG Shao-hua,CHEN Xiao-yu,ZHENG Ya-dong,JING Zhi-zhong,CAI Xue-peng.Effects of Codon Optimization in Tsol18 on Its Expression and Antigenicity of the Recombinant Protein[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2009,40(3).
Authors:DING Jun-tao  LUO Xue-nong  WANG Ying  ZHANG Shao-hua  CHEN Xiao-yu  ZHENG Ya-dong  JING Zhi-zhong  CAI Xue-peng
Abstract:
Keywords:Tsol18-sp
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