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| 实时荧光定量PCR检测伪狂犬病病毒方法的建立与初步应用 | |
| 引用本文： | 赵丽,崔保安,陈红英,魏战勇,郑兰兰,吕晓丽,文英会.实时荧光定量PCR检测伪狂犬病病毒方法的建立与初步应用[J].中国兽医学报,2009,29(4). |
| 作者姓名： | 赵丽 崔保安 陈红英 魏战勇 郑兰兰 吕晓丽 文英会 |
| 作者单位： | 1. 河南农业大学,牧医工程学院,河南,郑州,450002;郑州牧业工程高等专科学校,河南,郑州,450011 2. 河南农业大学,牧医工程学院,河南,郑州,450002 3. 西南民族大学,生命科学与技术学院,四川,成都,610041 |
| 基金项目： | 河南省杰出科研人才创新工程项目 |
| 摘 要： | 根据GenBank中猪伪狂犬病病毒(PRV)gE基因的序列(EF552427),利用Premier express设计并合成1对引物和相应的TaqMan探针,从猪伪狂犬病病毒(PRV)感染的细胞中提取DNA,进行PCR扩增.将鉴定正确的gE基因片段克隆入pGEM-T Easy载体中,转化大肠杆菌JM109,经PCR及测序鉴定后得到阳性重组质粒.以该阳性重组质粒为荧光定量PCR标准品模板建立标准曲线.对探针浓度、引物浓度、镁离子浓度和退火温度进行优化,建立了最佳的荧光定量PCR反应体系和扩增程序.经临床应用表明,该荧光定量PCR方法的建立为猪伪狂犬病病毒的早期诊断并定量分析猪伪狂犬病病毒感染程度奠定了基础. |
| 关 键 词： | 伪狂犬病病毒 荧光定量PCR 检测 |
Development and application of real-time fluorescent quantitative PCR assay to detect pseudorabies virus |
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| ZHAO Li,CUI Bao-an,CHEN Hong-ying,WEI Zhan-yong,ZHENG Lan-lan,LU Xiao-li,WEN Ying-hui.Development and application of real-time fluorescent quantitative PCR assay to detect pseudorabies virus[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2009,29(4). | |
| Authors: | ZHAO Li CUI Bao-an CHEN Hong-ying WEI Zhan-yong ZHENG Lan-lan LU Xiao-li WEN Ying-hui |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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