牛病毒性腹泻病毒NS3蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

用基因工程表达的牛病毒性腹泻病毒NS3蛋白免疫Balb／C小鼠，取免疫小鼠脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞进行融合，经间接ELISA方法筛选，获得3株稳定分泌抗BVDVNS3蛋白特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株（1A9、2C3和5D5），其细胞培养上清液ELISA效价分别为1：256、1：128和1：256，腹水ELISA效价分别为1：128000、1：64000和1：128000。亚型鉴定表明，1A9、2C3和5D5分别为IgG1、IgG2a和IgG1、ELISA结果显示，3株单克隆抗体仅与BVDVNS3蛋白和BVDV反应，不与其它相关病毒反应，表明3株单克隆抗体特异性良好。这3株单克隆抗体的获得为建立BVDV免疫学检测方法奠定了基础。