| 内蒙古绒山羊TNFRSF1A基因shRNA表达载体的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 马丽娜,杨峰,奈日乐,谢遇春,米璐,车天宇,王志新,王志英,王瑞军,苏蕊,张燕军,刘志红,李金泉.内蒙古绒山羊TNFRSF1A基因shRNA表达载体的构建及鉴定[J].家畜生态学报,2019,40(9):14-18. |
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| 作者姓名： | 马丽娜 杨峰 奈日乐 谢遇春 米璐 车天宇 王志新 王志英 王瑞军 苏蕊 张燕军 刘志红 李金泉 |
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| 作者单位： | 内蒙古农业大学动物科学学院动物遗传育种与繁殖自治区重点实验室农业部肉羊遗传育种重点实验室内蒙古自治区山羊遗传育种工程技术研究中心 |
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| 摘 要： | 通过设计和合成TNFRSF1A基因的3条靶向shRNA,并分别插入到pSGU6/GFP/Neo载体中,成功构建出了3个干扰载体,通过脂质体介导法将干扰载体成功转入到内蒙古绒山羊胎儿成纤维细胞中,并利用Real Time PCR检测TNFRSF1A基因的表达量。由结果可知,TNFRSF1A基因的干扰载体经测序鉴定证明构建成功,干扰载体转染内蒙古绒山羊胎儿成纤维细胞24 h后可见绿色荧光表达,当到达48 h时,转染效率达到最大, shRNA-1、 shRNA-2、 shRNA-3三组中TNFRSF1A的mRNA表达水平均低于转染空载体的NC组,且shRNA2对TNFRSF1A的mRNA表达具有最佳的干扰效果。综上所述,该研究成功构建了TNFRSF1A干扰载体,为进一步研究绒山羊TNFRSF1A基因在毛囊生长与周期调控的作用奠定基础。
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Construction and Identification of shRNA Expression Vector of TNFRSF1AGene in Inner Mongolia Cashmere Goat |
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