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犬细小病毒VP2基因的原核表达及间接ELISA方法的建立
引用本文:李慕瑶,姜骞,刘家森,司昌德,韩凌霞,曲连东.犬细小病毒VP2基因的原核表达及间接ELISA方法的建立[J].中国兽医科技,2007,37(3):218-222.
作者姓名:李慕瑶  姜骞  刘家森  司昌德  韩凌霞  曲连东
作者单位:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,黑龙江哈尔滨150001
基金项目:中央级科研院所科技基础性工作专项资金项目(2001DEB20055)
摘    要:根据GenBank上发表的犬细小病毒(CPV)VP2蛋白基因序列,设计并合成1对引物,通过PCR扩增VP2基因全长。将其克隆到pET一30a载体中,构建了原核表达载体pET—VP2,转化大肠杆菌Rosetta,表达并纯化了重组蛋白,Western—blotting证明该重组蛋白具有免疫原性。利用重组蛋白为抗原,通过方阵试验确定了包被抗原的最佳包被量为15.8ng/孔,血清的最佳稀释倍数为1:100,建立了检测CPV血清抗体的间接ELISA方法。

关 键 词:VP2基因  原核表达  纯化  间接ELISA
文章编号:1673-4696(2007)03-0218-05
收稿时间:2006-11-14
修稿时间:2007-02-09

Prokaryotic expression of canine parvovirus VP2 gene and establishment of an indirect ELISA
LI Mu-yao,JIANG Qian, LIU Jia-sen, SI Chang-de, HAN Ling-xia,QU Lian-dong.Prokaryotic expression of canine parvovirus VP2 gene and establishment of an indirect ELISA[J].Chinese Journal of Veterinary Science and Technology,2007,37(3):218-222.
Authors:LI Mu-yao  JIANG Qian  LIU Jia-sen  SI Chang-de  HAN Ling-xia  QU Lian-dong
Abstract:
Keywords:VP2 gene  prokaryotic expression  purification  indirect ELISA
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