| 乳酸克鲁维斯酵母乳糖酶基因的克隆及原核表达 |
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| 引用本文： | 刘爱兵,张伟,李名扬.乳酸克鲁维斯酵母乳糖酶基因的克隆及原核表达[J].西南大学学报,2004,26(5). |
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| 作者姓名： | 刘爱兵 张伟 李名扬 |
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| 作者单位： | 刘爱兵,李名扬(西南农业大学,重庆,400716);张伟(中国农业科学院,生物技术研究所,北京,100081) |
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| 摘 要： | 从乳酸克鲁维斯酵母(Kluyveromyces lactis)菌株k 538中克隆获得乳糖酶基因klac,并将其插入到表达栽体pET -30 a(+)上构建重组表达质粒pETlac 4.将pETlac 4电击转化到大肠杆菌BL 21中,分别研究了阳性转化子在28℃,37℃下经IPTG诱导3 h后的蛋白表达情况.表达产物的SDS-PAGE分析和酶活性测定表明,klac基因在大肠杆菌中获得活性表达,其中低温条件28℃下的表达水平明显高于37℃,28℃诱导的细胞经超声波破碎所测酶活力为0.475 U/mL,37℃仅为0.134 U/mL.
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| 关 键 词： | 乳糖酶基因 原核表达 酶活力 |
CLONING AND EXPRESSION IN E.COLI OF LACTASE GENE FROM KLUYVEROMYCES LACTIS |
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