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鲑鱼甲病毒逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法研究
引用本文:刘艳华,任彤,谈艳苗,张利峰.鲑鱼甲病毒逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法研究[J].中国动物检疫,2018,35(10):99-103.
作者姓名:刘艳华  任彤  谈艳苗  张利峰
基金项目:国家质量监督检验检疫总局科技计划项目(2016IK013)
摘    要:鲑鱼甲病毒(Salmonid alphavirus,SAV)是鲑鱼胰脏病(Salmon pancreas disease,PD)病原,主要感染鲑科鱼类,目前在我国尚未分离到。为提高出入境鱼类中的SAV检测效率,根据SAV nsP1基因片段,设计3对特异性引物,建立了检测SAV的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法。该方法使用25μL反应体系,经优化后的反应温度为65℃,反应时间为1 h,检测限可达10个拷贝数的病毒核酸,且不与传染性鲑鱼贫血病毒、病毒性出血性败血症病毒、传染性造血器官坏死病毒、病毒性神经坏死病病毒、草鱼呼肠孤病毒和鲤春病毒血症病毒的RNA产生交叉反应。在反应体系中加入染料后,反应结果肉眼直接可见。本研究建立的RTLAMP方法是一种特异性强、方便快捷的SAV检测方法,适合SAV的现场初筛和核酸检测。

关 键 词:鲑鱼甲病毒  逆转录环介导等温扩增检测方法  检测限  特异性

Development of a RT-LAMP Detection Method for Salmonid alphavirus
Liu Yanhu,Ren Tong,Tan Yanmiao,Zhang Lifeng.Development of a RT-LAMP Detection Method for Salmonid alphavirus[J].China Journal Of Animal Quarantine,2018,35(10):99-103.
Authors:Liu Yanhu  Ren Tong  Tan Yanmiao  Zhang Lifeng
Abstract:
Keywords:
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