| 新疆贝母DNA提取及ISSR-PCR体系的建立与优化 |
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| 引用本文： | 王果平,樊丛照,李晓瑾,朱军.新疆贝母DNA提取及ISSR-PCR体系的建立与优化[J].种子,2012,31(8):27-30,35. |
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| 作者姓名： | 王果平 樊丛照 李晓瑾 朱军 |
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| 作者单位： | 新疆维吾尔自治区中药民族药研究所,乌鲁木齐,830002 |
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| 基金项目： | 新疆维吾尔自治区自然科学青年基金项目 |
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| 摘 要： | 目的:从新疆贝母干叶片中提取高质量的DNA,建立ISSR-PCR体系并进行优化。方法:通过改进的CTAB法提取基因组DNA;综合利用单因素实验和L9(34)正交实验2种方法,对镁离子、dNTP、模板DNA含量、TaqDNA聚合酶量、引物浓度等因素进行优化,并采用温度梯度筛选引物的退火温度。结果:新疆贝母20μL ISSR-PCR最适反应体系dNTP为0.3 mmol/L,Mg2+为2.0 mmol/L,模板浓度为40～100 ng/(20μL),引物为1.2 mmol/L,Taq DNA聚合酶为1.0 U/20μL,引物UBC 859的最适退火温度为50.7℃。结论:此提取方法得到的DNA纯度高,ISSR-PCR扩增效果显著,为新疆贝母种质资源鉴定、遗传多样性分析奠定研究基础。
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| 关 键 词： | 新疆贝母 DNA提取 ISSR-PCR 体系优化 |
DNA Extraction and Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Fritillaria walujewii |
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| WANG Guo-ping
,
FAN Cong-zhao
,
LI Xiao-jin
,
ZHU Jun.DNA Extraction and Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Fritillaria walujewii[J].Seed,2012,31(8):27-30,35. |
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| Authors: | WANG Guo-ping FAN Cong-zhao LI Xiao-jin ZHU Jun |
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| Institution: | (Xinjiang Institute of Chinese Traditional Medica and Ethical Materia Medica,Urumq 830002,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | |
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